六、常见问题及解决方法-谱图部分 （一）、 峰拖尾 原因 解决方法 1、筛板阻塞 1、a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱 2、色谱柱塌陷 2、填充色谱柱 3、干扰峰 3、a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱 4、流动相PH选择错误 4、调整PH值。对于碱性化合物，低PH值更有利于得到对称峰 5、样品与填料表面的溶化点发生反应 5、a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂 b、更改色谱柱 （二）、 峰前延 原因 解决方法 1、柱温低 1、升高

五、常见问题及解决方法-压力部分 （一）、流动相不流动，没有压力显示 原因 解决方法 1、电源问题 1、接通电源，开机 2、保险丝被烧坏 2、更换保险丝 3、控制器设定不正确或设定失败 3、a、采取恰当的设定 b、修理或更换控制器 4、柱塞杆折断 4、更换柱塞杆 5、泵头内有空气 5、溶剂脱气、启动泵抽出空气 6、流动相不足 6、a、补充流动相 b、更换入口滤头 7、单向阀损坏 7、更换单向阀 8、漏液 8、拧紧或更换手紧接头 （二）、流动相流动，但没

亲爱的各位吧友：欢迎来到高效液相使用与维护

四、基本操作过程 1、检查废液收集瓶空间是否够用，检查系统是否连接完成（各个组件、电脑、打印机等）。 2、配制5%甲醇溶液，滤过，超声至少15分钟，再接入系统中，观察5%甲醇溶剂瓶中无析出、沉淀及浑浊等现象后，开始下一步操作。 注意：过滤时选用0.45微米孔径有机滤膜（又称油膜）。 3、打开排气阀，然后开机排气至少5分钟，再把流速调节为0，关闭排气阀。 注意：如果未打开排气阀直接开机或者在较高流速关闭排气阀，就会瞬间产生较

三、高效液相系统组成 1、HPLC系统组成 HPLC 系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代 HPLC 仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。 目前常见的 HPLC 仪生产厂家国外有 Waters（沃特世） 公司、Agilent（安捷伦）公司 、岛津公司等，国内有大连依利特公司等。 1.1输液泵 输液泵是 HPLC 系统中最

二、基本概念和基本参数 1、基本概念 1.1、色谱图--样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线，又称色谱流出曲线。 1.2、基线--经流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。 1.3、噪音--基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。 1.4、漂移--基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，

一、色谱法简介 1、色谱分离原理 溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用（吸附、分配、离子吸引等）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。 2、常用分析色谱分类 2.1、液液分配色谱法 根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。 将特定的物质化学键合于担体表面而形成的固定相，如 C18柱、C8柱、氨基柱、氰基柱和苯基柱等。 液液色谱法按固定相和流动