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高效液相新手进阶培训-6

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六、常见问题及解决方法-谱图部分
(一)、 峰拖尾
原因 解决方法
1、筛板阻塞 1、a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱
2、色谱柱塌陷 2、填充色谱柱
3、干扰峰 3、a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱
4、流动相PH选择错误 4、调整PH值。对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰
5、样品与填料表面的溶化点发生反应 5、a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂 b、更改色谱柱
(二)、 峰前延
原因 解决方法
1、柱温低 1、升高柱温
2、样品溶剂选择不恰当 2、使用流动相作为样品溶剂
3、样品过载 3、降低样品含量
4、色谱柱损坏 4、见A1、A2
(三)、 峰分叉
原因 解决方法
1、保护柱或分析柱污染图 1、取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱或更换色谱柱。
2、样品溶剂不溶于流动相 2、改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。
(四)、 峰变形
原因 解决方法
1、样品过载 1、减少样品载量
2、样品溶剂选择不恰当 2、a、减少进样体积 b、运用低极性样品溶剂
3、缓冲不合适 3、a、使用浓度50-100mM的缓冲液 b、使用Pka适宜的缓冲液
说明:色谱峰的变化还有很多,具体问题还要具体分析,这也是色谱问题研究的一个重点。


1楼2020-08-12 23:07回复
    有专门的培训么


    IP属地:上海来自iPhone客户端2楼2020-12-09 15:34
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