一、细胞 1.细胞接种浓度的选择 • 贴壁细胞：鉴于细胞尺寸的差异，建议依据实际情况适当调整细胞密度分布。 • 悬浮细胞：通常在96孔板中，每孔置入10000个细胞，可通过细胞计数方式进行布板。 采用状态优良的细胞进行铺板，传代过多的细胞不宜使用。铺板过稀，细胞杀伤效果不明显；铺板过密，细胞可能大量死亡。细胞密度多采用10000个/孔，100ul/孔。 2.药物浓度与处理时长的设定 • 不同细胞对药物的敏感性不同。若药物浓度未知，可查阅相

细胞加药物有时候也是让人头疼，稍一过量，不过数小时细胞便失去活力；而剂量不足，则难以构建出理想的实验模型。药物的有效性及安全性与其在细胞内的浓度紧密相连。所以，精通细胞内药物浓度的计算方法，对于药物研究而言极为关键。 细胞给药计算公式 细胞内药物浓度计算：细胞内药物浓度 = 给药浓度 × 细胞摄入率 × 细胞量 / 细胞体积 细胞给药具体步骤 一、药物配制： 固体药物配制： 公式：药物质量(mg) = 目标浓度(mM) × 溶剂体积(L) ×

一、细胞核（Nucleus）染色指南 1. 常用染色剂 • DAPI：经典的DNA结合染料，紫外激发下呈蓝色荧光，适用于固定细胞的核染色。 • Hoechst：可穿透活细胞，与DNA结合后发出蓝色荧光，适用于活细胞实验。 • PI（碘化丙啶）：仅染色死细胞，与DNA结合后显红色荧光，用于凋亡与死细胞检测。 2. 应用特性 这些染色剂能清晰显示细胞核形态，适用于细胞形态学观察、核分裂及细胞周期研究。DAPI与Hoechst适用于所有细胞核标记，而PI则用于区分活死细胞。 3.

一、实验原理 Western blot技术（亦称作蛋白质印迹法）是一种在科研中频繁应用的手段，用于分离并确认蛋白质的身份。该技术通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（即SDS-PAGE）技术，将样本中的各类蛋白质进行分离，随后将这些已分离的蛋白质转移至硝酸纤维素膜或PVDF膜上。此后的步骤涉及将膜与目标蛋白质的特异性抗体共同孵育。在洗涤膜的过程中，非特异性结合的抗体被去除，仅留下与目标蛋白质紧密结合的抗体，最终通过胶片显影或荧光扫描的方式来

PCR（Polymerase Chain Reaction，聚合酶链式反应）是一种分子生物学技术，用于在生物体外快速、大量地复制特定的DNA片段。尽管PCR实验的原理和操作流程看似简单，但实际操作中却存在许多潜在的问题。以下是一些常见的PCR实验问题及相应的解决方案。 01拖尾、弥散现象 • 可能原因：体系配置偏差（如酶用量、dNTP、镁离子浓度过高）、扩增循环数过多、PCR体系中存在污染、电泳缓冲液不净、电压不稳定、退火时间不当、模板不纯等。 • 解决方案：减少

荧光素酶报告基因（Luc）系统，依托荧光素为底物，巧妙检测萤火虫荧光素酶活性。此酶能催化荧光素氧化为oxyluciferin，过程中释放生物荧光，成为研究热点。 荧光素酶家族庞大，能催化多样底物发光，而哺乳细胞却无此内源酶。其中，细菌荧光素酶因热敏性在哺乳细胞研究中受限；萤火虫荧光素酶则凭借高灵敏度、宽检测范围（7-8个数量级），成为哺乳细胞研究的首选，尤其适合高通量筛选。更值得一提的是，新型萤火虫荧光素酶无需细胞裂解即

在探索基因编辑动物的领域，我们时常会遇到这些经过人为“命运改写”的生命体展现出各式各样的非典型特征。那么，针对基因编辑动物常见的异常症状，我们应如何处理呢？ 脱毛问题 毛发脱落，在野生小鼠及其基因编辑后代中均时有发生。处理这一问题时，首要任务是区分其原因为生理性还是病理性。 • 生理性脱毛：这可能源于遗传因素（如C57BL/6品系常见）或同伴间的相互理毛行为。此类脱毛通常不会随时间恶化，且皮肤保持健康状态。特定

细胞实验是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下，在无菌、适温和丰富的营养条件下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能，进而完善相关实验的过程。存在证据等级低的劣势，但由于其来源容易获取、有细胞特异性及实验周期短、成本低等特点，被广泛应用于实验中。需要无菌无毒细胞培养环境、恒定的细胞生长温度(37°C)、合适的气体环境(溶氧和二氧化碳)、适宜的pH及合适的细胞培养基和血清。 细胞的类型 根据细胞的来源（1）原代细胞(

圆筒实验通常用于检测实验大鼠受损上肢的自主运动功能。圆筒实验是针对于不对称中枢神经系统疾病的研究工具，主要研究啮齿类动物在贴壁站立的过程中肢体不对称使用的情况，识别动物的感觉运动功能损伤。本实验对神经退行性疾病的模型，如帕金森，ALS，阿尔兹海默症，中风的行为学检测有重要意义。 一实验步骤将小鼠放在直径为20cm、高度为40cm的透明树脂玻璃圆筒内，观察其自发站立探究活动5min并录制视频。然后分析视频，以评估鼠的左

1，多对比，多考察 2，看专业，看服务，看质量，看规模 3，看售后，能参与到实验当中的最好，保证数据真实

医疗器械的临床前动物实验涉及的实验动物较多，小鼠、大鼠、兔、犬、猪、羊、猕猴等，这些动物在医疗器械的动物实验中都是必须的。生物相容性研究中：遗传毒性主要使用小鼠,，致敏、刺激主要使用豚鼠，因为豚鼠对药物性的刺激极很敏感。可降解材料的降解研究主要使用大鼠。医疗器械可行性、安全性和有效性研究中：心脏、骨科类的产品主要用羊、猪和犬，因为小型猪脏器解剖结构与人类比较接近。如心脏病和血管类的器械主要用猪。止

多通道维持记录设备的技术革新 多通道小动物体温维持记录仪本仪器具有测温、控温和加热、体温记录等功能，用于维持试验动物正常体温。该设备测、控精度高，响应迅速快，工作稳定可靠，对试验动物无电磁干扰。 精细控制的科学意义 在生物医学研究中，小动物体温的细微变化都可能对实验结果产生重大影响。例如，在药品代谢研究中，体温的波动可能影响药品的吸收、分布、代谢和排泄过程，从而影响实验结果的准确性。通过多通道维持记录

一、单臂数显定位仪的基本概述 数显脑立体定位仪又称脑固定装置，它是利用颅骨外面的标志或其它参考点所规定的三度坐标系统，来确定皮层下某些神经结构的位置，以便在非直视暴露下对其进行定向的刺激、破坏、引导电位等研究。是神经解剖、神经生理、神经药理和神经外科等领域内的重要研究设备，用于对神经结构进行定向的注射、刺激、破坏、引导电位等操作，可用于帕金森氏病动物模型建立，学习记忆，脑内神经干细胞移植，脑缺血等

自由落体脑外模型给你答案 创伤性脑损伤是指暴力作用于头部造成脑组织器质性损伤。脑外伤幸存者遗留下的短暂或永久的躯体功能障碍、认知障碍以及心理障碍是临床工作中经常遇到的问题。为了更好的研究这些问题的发病机制，脑击打损伤模型是必做的实验之一。 SD大鼠脑击打损伤动物模型 1.剥开软组织，剥离骨外膜，暴露左侧顶骨； 2.在冠状缝后4mm，中线旁左右侧2.5mm处，用高速颅骨钻钻2个小孔，并扩大为直径6mm的骨窗，暴露蛛网膜并保持硬

中医药动物模型常见问题解析 1.所选动物与疾病人群体质不符问题 应注重模型动物体质与疾病好发人群的相符性，采用与发病人群相符体质的动物造模。 2疾病与证候关联性不强问题 证候是发病原因的体现，目前模型仍以西医病理病因造模方法主，施加以中医证候体现的干预因素，未能较好地体现疾病和证候之间的因果关联，可以通过大量文献统计，找出该类疾病发生的主要证型，在证候模型基础上施加疾病发生的诱因可能成为该问题解决的主要途

在生命科学的发展历程中，模式动物发挥了重要的作用。例如：果蝇模型的建立加速推进了遗传学和发育生物学的发展；利用大鼠、小鼠构建的基因敲除和敲入动物模型，为包括生物化学与生物物理学在内的蛋白质科学相关研究提供了重要工具；构建人类疾病的非人灵长类动物模型为神经科学和心理学等领域发展做出了重要贡献。中医药动物模型指用于中医药相关研究中的动物模型，其广泛应用于中医药的现代化研究，在揭示中医药基础理论、中药作

动物造模 高尿酸血症造模为什么不容易成功？高尿酸血症（(hyperuricemia, HUA)）是由于嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄不足所导致体内尿酸升高的代谢紊乱疾病，随着生活水平的提高和饮食结构的改变、人口老龄化及肥胖的流行，高尿酸血症在世界各地的发病率和患病率均呈逐渐上升趋势。长期 HUA 可诱发多种并发症, 如痛风、Ⅱ型糖尿病、心血管疾病、肝肾功能损伤等。但是模拟和研究人体HUA 并发症的病理诱导过程, 构建长期、稳定的HUA动物模型却不那么容

衰老——是每个人从降临到这个世界后就要面对的事情，而“为什么会衰老”、“如何延缓衰老的发生”等问题，可谓是科学界最为深奥、最吸引人的话题。 扪心自问一下，你是否有过那么一瞬间感觉自己“老了”？是突然发现自己一口气爬不上六楼了？或是在熬夜的时候感到心脏在“突突突”直跳？ 虽说年龄只是个数字，但不同的生活方式以及健康状态会使得身体呈现出不一样的“年龄”，年近半百的刘畊宏教练曾自爆身体年龄仅有28岁，也有网

分子克隆实验——无缝克隆 今天和大家讲讲无缝克隆常见的问题以及解决方法。 1.平板上很少或者没有克隆菌落 建议使用试剂盒附带的阳性对照，可排除试剂盒本身的影响。进一步判定，主要有以下可能的情况和建议： 01载体制备 线性化载体和插入片段的纯度不够，抑制反应。 02插入片段制备 1、引物设计不正确：同源臂15~25nt（不计算酶切位点）,CG含量40~60%。 2、线性化载体和插入片段的纯度不够，抑制反应。若线性化载体与插入片段已经过纯化，

采用“水上转盘法”建立大鼠全睡眠剥夺模型。本方法一是剥夺动物全部睡眠的方法，根据实验动物怕水的习性设计而成。剥夺装置主要由剥夺箱、转盘及转盘相连接的动力装置三部分组成。箱内盛水，转盘基座与箱底连接，周围注水，转盘高出水面，动物放在转盘上后，匀速转动。由于动物子啊睡眠状态时肌张力降低，离心作用使其掉入水中而惊醒，为避免掉入水中，动物必须不停活动，从而达到剥夺睡眠的目的。 模型制作方法： SD大鼠，体重140-1

关于实验外包： 实验室成立15年之久，已与国内超过500家研究机构、上千名基础领域研究人员进行研发合作。与协和医院、北京大学医学部、301医院、海洋大学、哈尔滨理工大学、山东大学、中医科学院、军事医学科学院等研究机构建立了长期合作关系。 实验室占地面积6000平米，新的实验基地正在建设中，占地面积33000平米。MDL实验室拥有6大实验平台，分子实验平台、蛋白实验平台、细胞实验平台、动物实验平台、临床检测实验平台、病理实验平台

立足于生物医学实验、快速检测一站式技术服务，是很早推出整体实验外包的服务机构。 经过10余年的发展，我们与国内超过百余家的研究机构上千名研究人员共同完成了12000+的实验项目,在中国生物医药实验技术服务领域极具行业影响力。 是一家科研CRO整体外包服务提供商，主要服务项目：生物模型、分子生物学、免疫学、蛋白质学、细胞生物学、病理毒理病毒、快速检测等科研服务。 六大实验平台：动物实验平台、细胞实验平台、分子实验平台

现有实验室超过6000平米，还有3.3万实验室正在在建设中，北京周边实验基地，聚焦基础科研、动物模型、细胞模型、组学服务、生物信息学、基因检测、细胞增殖、细胞周期凋亡、细胞培养、病毒包装 ,稳定株情选、原代细胞分离、流式检测、平板克隆、划痕、侵袭江移、WB、蛋白抽提、蛋白定量、蛋白质纯化、蛋白双向电泳、明胶酶谱、定量PCR、荧光定量PCR服务、包埋切片爬片、免疫组化、免疫荧光等医学科学基础研究与转化医学的研究。08年至今

以1%戊巴比妥钠溶液（50mg/kg）腹腔注射麻醉大鼠。 将大鼠固定于手术台上，沿中线切开头皮挂线旷置。 手术显微镜下沿眶内缘小心分离左眶软组织，尽量向两眦延伸和视神经眶内段。 依照解剖层次分别牵开眼外肌肉，充分暴露眼球后极纵向切开视神经背侧鞘膜，注意避免伤及视网膜中央动脉。 在眼球后极1.5mm处以显微剪剪断视神经。