一、细胞核（Nucleus）染色指南
1. 常用染色剂
• DAPI：经典的DNA结合染料，紫外激发下呈蓝色荧光，适用于固定细胞的核染色。
• Hoechst：可穿透活细胞，与DNA结合后发出蓝色荧光，适用于活细胞实验。
• PI（碘化丙啶）：仅染色死细胞，与DNA结合后显红色荧光，用于凋亡与死细胞检测。
2. 应用特性
这些染色剂能清晰显示细胞核形态，适用于细胞形态学观察、核分裂及细胞周期研究。DAPI与Hoechst适用于所有细胞核标记，而PI则用于区分活死细胞。
3. 操作提示
• 避光操作：DAPI与Hoechst需避光保存与操作，以防荧光淬灭。
• 选择渗透性：根据实验需求选择染色剂，DAPI适用于固定细胞，Hoechst适用于活细胞。
• 优化固定条件：固定细胞时，需选用合适的固定剂与固定时间，以维持细胞结构完整。
二、线粒体（Mitochondria）染色指南
1. 常用染色剂
• MitoTracker系列：高稳定性染料，适用于活细胞与固定细胞，可长期观察线粒体形态。
• JC-1：线粒体膜电位指示剂，正常膜电位下呈红色荧光，膜电位降低时转绿色。
• TMRM：橙色荧光染料，用于监测线粒体功能状态。
2. 应用特性
线粒体染色剂用于观察线粒体形态、数量及功能状态。MitoTracker显示线粒体分布，JC-1与TMRM则监测膜电位变化，反映细胞能量状态与凋亡过程。
3. 操作提示
• 活细胞染色：线粒体染色需在活细胞中进行，确保线粒体活性。
• 浓度优化：从低浓度开始染色，避免高浓度对线粒体的潜在损伤。
• 弱光操作：线粒体荧光染料对光敏感，需在暗环境下操作与观察。
三、内质网（Endoplasmic Reticulum, ER）染色指南
1. 常用染色剂
• ER-Tracker：高特异性活细胞ER标记染料。
• Calnexin：ER膜蛋白，ER应激的标志性蛋白。
• PDI（蛋白二硫键异构酶）：ER中的关键折叠酶，用于研究ER功能。
2. 应用特性
ER-Tracker适用于活细胞ER结构的实时观察，而Calnexin与PDI则用于固定细胞，特别是ER应激与蛋白质折叠研究。
3. 操作提示
• 温和条件：避免高温与机械应力，保护内质网结构。
• 活细胞使用：ER-Tracker需在活细胞中使用，染色后尽快成像。
• 优化应激实验：ER应激研究中，需谨慎选择染色剂与实验条件。
四、高尔基体（Golgi Apparatus）染色指南
1. 常用染色剂
• Golgi-Tracker：特异性高尔基体活细胞染料。
• GM130：经典高尔基体标志蛋白，参与结构维持。
• Giantin：高尔基体标志蛋白，显示整体结构。
2. 应用特性
这些染色剂用于观察高尔基体的动态变化与功能。GM130与Giantin适用于固定细胞，而Golgi-Tracker则适用于活细胞，对研究细胞分泌途径至关重要。
3. 操作提示
• 室温操作：高尔基体对温度敏感，建议在室温下进行实验。
• 谨慎固定：选择适当的固定剂与条件，避免高尔基体结构破坏。
五、溶酶体（Lysosome）染色指南
1. 常用染色剂
• LysoTracker系列：活细胞溶酶体实时染色剂，荧光信号强。
• LAMP1：溶酶体膜蛋白，用于观察溶酶体数量与功能。
• Cathepsin D：溶酶体蛋白酶，检测溶酶体活性。
2. 应用特性
溶酶体染色剂用于研究溶酶体的结构、数量与功能。LysoTracker适用于活细胞，动态观察溶酶体分布；LAMP1与Cathepsin D则用于固定细胞，评估溶酶体功能。
3. 操作提示
• 酸性环境：保持溶酶体酸性环境，确保染色效果。
• 控制染色时间：避免非特异性背景染色，确保最佳染色效果。
六、过氧化物酶体（Peroxisome）染色指南
1. 常用染色剂
• Peroxisome-Tracker：活细胞过氧化物酶体标记染料。
• Catalase：过氧化物酶体抗氧化酶，反映功能状态。
• PMP70：过氧化物酶体膜蛋白，用于检测数量与结构。
2. 应用特性
过氧化物酶体染色剂用于研究细胞内的氧化反应与脂肪酸分解。Peroxisome-Tracker适用于活细胞，Catalase与PMP70则用于固定细胞，探究抗氧化应激功能。
3. 操作提示
• 避免强氧化剂：保护过氧化物酶体免受氧化应激影响。
• 细胞状态：确保细胞处于健康状态，以准确反映过氧化物酶体功能。
七、细胞骨架（Cytoskeleton）染色指南
1. 常用染色剂
• Phalloidin：与肌动蛋白结合，标记微丝结构。
• α-Tubulin：标记微管，观察细胞分裂与结构支撑。
• Vimentin：中间丝蛋白，标记中间纤维结构。
2. 应用特性
细胞骨架染色剂用于观察细胞内部的支撑结构与动态变化。Phalloidin、α-Tubulin与Vimentin分别标记微丝、微管与中间纤维，适用于细胞运动、分裂与结构分析。
3. 操作提示
• 优化固定条件：选择适当的固定剂与时间，维持细胞结构完整。
• 轻柔操作：避免机械干扰，确保染色均匀且细胞结构未受损。
1. 常用染色剂
• DAPI：经典的DNA结合染料，紫外激发下呈蓝色荧光，适用于固定细胞的核染色。
• Hoechst：可穿透活细胞，与DNA结合后发出蓝色荧光，适用于活细胞实验。
• PI（碘化丙啶）：仅染色死细胞，与DNA结合后显红色荧光，用于凋亡与死细胞检测。
2. 应用特性
这些染色剂能清晰显示细胞核形态，适用于细胞形态学观察、核分裂及细胞周期研究。DAPI与Hoechst适用于所有细胞核标记，而PI则用于区分活死细胞。
3. 操作提示
• 避光操作：DAPI与Hoechst需避光保存与操作，以防荧光淬灭。
• 选择渗透性：根据实验需求选择染色剂，DAPI适用于固定细胞，Hoechst适用于活细胞。
• 优化固定条件：固定细胞时，需选用合适的固定剂与固定时间，以维持细胞结构完整。
二、线粒体（Mitochondria）染色指南
1. 常用染色剂
• MitoTracker系列：高稳定性染料，适用于活细胞与固定细胞，可长期观察线粒体形态。
• JC-1：线粒体膜电位指示剂，正常膜电位下呈红色荧光，膜电位降低时转绿色。
• TMRM：橙色荧光染料，用于监测线粒体功能状态。
2. 应用特性
线粒体染色剂用于观察线粒体形态、数量及功能状态。MitoTracker显示线粒体分布，JC-1与TMRM则监测膜电位变化，反映细胞能量状态与凋亡过程。
3. 操作提示
• 活细胞染色：线粒体染色需在活细胞中进行，确保线粒体活性。
• 浓度优化：从低浓度开始染色，避免高浓度对线粒体的潜在损伤。
• 弱光操作：线粒体荧光染料对光敏感，需在暗环境下操作与观察。
三、内质网（Endoplasmic Reticulum, ER）染色指南
1. 常用染色剂
• ER-Tracker：高特异性活细胞ER标记染料。
• Calnexin：ER膜蛋白，ER应激的标志性蛋白。
• PDI（蛋白二硫键异构酶）：ER中的关键折叠酶，用于研究ER功能。
2. 应用特性
ER-Tracker适用于活细胞ER结构的实时观察，而Calnexin与PDI则用于固定细胞，特别是ER应激与蛋白质折叠研究。
3. 操作提示
• 温和条件：避免高温与机械应力，保护内质网结构。
• 活细胞使用：ER-Tracker需在活细胞中使用，染色后尽快成像。
• 优化应激实验：ER应激研究中，需谨慎选择染色剂与实验条件。
四、高尔基体（Golgi Apparatus）染色指南
1. 常用染色剂
• Golgi-Tracker：特异性高尔基体活细胞染料。
• GM130：经典高尔基体标志蛋白，参与结构维持。
• Giantin：高尔基体标志蛋白，显示整体结构。
2. 应用特性
这些染色剂用于观察高尔基体的动态变化与功能。GM130与Giantin适用于固定细胞，而Golgi-Tracker则适用于活细胞，对研究细胞分泌途径至关重要。
3. 操作提示
• 室温操作：高尔基体对温度敏感，建议在室温下进行实验。
• 谨慎固定：选择适当的固定剂与条件，避免高尔基体结构破坏。
五、溶酶体（Lysosome）染色指南
1. 常用染色剂
• LysoTracker系列：活细胞溶酶体实时染色剂，荧光信号强。
• LAMP1：溶酶体膜蛋白，用于观察溶酶体数量与功能。
• Cathepsin D：溶酶体蛋白酶，检测溶酶体活性。
2. 应用特性
溶酶体染色剂用于研究溶酶体的结构、数量与功能。LysoTracker适用于活细胞，动态观察溶酶体分布；LAMP1与Cathepsin D则用于固定细胞，评估溶酶体功能。
3. 操作提示
• 酸性环境：保持溶酶体酸性环境，确保染色效果。
• 控制染色时间：避免非特异性背景染色，确保最佳染色效果。
六、过氧化物酶体（Peroxisome）染色指南
1. 常用染色剂
• Peroxisome-Tracker：活细胞过氧化物酶体标记染料。
• Catalase：过氧化物酶体抗氧化酶，反映功能状态。
• PMP70：过氧化物酶体膜蛋白，用于检测数量与结构。
2. 应用特性
过氧化物酶体染色剂用于研究细胞内的氧化反应与脂肪酸分解。Peroxisome-Tracker适用于活细胞，Catalase与PMP70则用于固定细胞，探究抗氧化应激功能。
3. 操作提示
• 避免强氧化剂：保护过氧化物酶体免受氧化应激影响。
• 细胞状态：确保细胞处于健康状态，以准确反映过氧化物酶体功能。
七、细胞骨架（Cytoskeleton）染色指南
1. 常用染色剂
• Phalloidin：与肌动蛋白结合，标记微丝结构。
• α-Tubulin：标记微管，观察细胞分裂与结构支撑。
• Vimentin：中间丝蛋白，标记中间纤维结构。
2. 应用特性
细胞骨架染色剂用于观察细胞内部的支撑结构与动态变化。Phalloidin、α-Tubulin与Vimentin分别标记微丝、微管与中间纤维，适用于细胞运动、分裂与结构分析。
3. 操作提示
• 优化固定条件：选择适当的固定剂与时间，维持细胞结构完整。
• 轻柔操作：避免机械干扰，确保染色均匀且细胞结构未受损。
