KTB1030-CN-CheKine 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒在细胞氧化应激研究中的应用
KTB1030-CN-CheKine 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒在细胞氧化应激研究中的应用
摘要
本研究着重探究 CheKine 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒在细胞氧化应激研究中的应用价值。通过对过氧化氢、紫外线等多种氧化应激因素处理的细胞样本进行检测,发现该试剂盒能精准测定 SOD 活性。其操作流程简便,且具有高灵敏度与特异性,为深入剖析细胞氧化应激损伤机制、评估抗氧化剂对细胞保护作用等研究提供关键技术支撑,极大地推动细胞生物学领域对氧化应激相关问题的深入理解与探索。
一、引言
细胞氧化应激是指细胞内活性氧(ROS)产生与清除失衡,过量的 ROS 会攻击细胞内生物大分子,如脂质、蛋白质和核酸,导致细胞损伤和功能障碍。SOD 作为细胞内重要的抗氧化酶,能催化超氧阴离子自由基发生歧化反应,生成氧气和过氧化氢,从而维持细胞内 ROS 稳态。准确测定 SOD 活性对于研究细胞氧化应激机制、开发抗氧化治疗策略具有重要意义。CheKine 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒的出现,为该领域研究提供了高效工具。
二、材料与方法
1.细胞系:选用人肝癌细胞系 HepG2 和小鼠成纤维细胞系 NIH/3T3。
1.氧化应激诱导:采用不同浓度的过氧化氢溶液(0.1 - 1 mM)处理细胞 2 小时,或用紫外线照射(20 J/m²)细胞模拟氧化应激环境。
1.样本处理:收集处理后的细胞,用试剂盒提供的细胞裂解液裂解细胞,4℃、12000 rpm 离心 15 分钟,取上清用于 SOD 活性检测。
1.检测过程:按照 CheKine 试剂盒说明书,将细胞裂解上清与试剂 A、试剂 B 等依次混合,在 37℃孵育 20 分钟,使用酶标仪在 550 nm 波长下测定吸光度。通过标准曲线计算 SOD 活性。
三、结果与分析
1.氧化应激对 SOD 活性影响:随着过氧化氢浓度增加或紫外线照射,两种细胞系内 SOD 活性呈现先升高后降低的趋势。在 0.5 mM 过氧化氢处理时,HepG2 细胞 SOD 活性较对照组升高约 50%,但 1 mM 过氧化氢处理后,SOD 活性显著下降。这表明细胞在轻度氧化应激时可诱导 SOD 表达以抵御损伤,但重度氧化应激会导致 SOD 活性受抑制。
1.试剂盒性能验证:对同一样本重复检测 5 次,SOD 活性测定结果的变异系数小于 5%,显示出良好的重复性。与经典的黄嘌呤氧化酶法测定结果对比,相关性分析显示两者具有高度相关性(r > 0.98),证明该试剂盒准确性高。
四、结论
CheKine 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒在细胞氧化应激研究中表现卓越,能精确测定 SOD 活性,为揭示细胞氧化应激损伤与修复机制提供有力支持,有助于筛选和开发有效的抗氧化剂用于细胞保护。
技术支持
亚科因(武汉)生物技术有限公司
Abbkine亚科因致力于细胞科研检测及细胞治疗领域关键生化检测试剂盒的研发、生产和销售,成为全球细胞制药领域创新的关键推动者
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摘要
本研究着重探究 CheKine 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒在细胞氧化应激研究中的应用价值。通过对过氧化氢、紫外线等多种氧化应激因素处理的细胞样本进行检测,发现该试剂盒能精准测定 SOD 活性。其操作流程简便,且具有高灵敏度与特异性,为深入剖析细胞氧化应激损伤机制、评估抗氧化剂对细胞保护作用等研究提供关键技术支撑,极大地推动细胞生物学领域对氧化应激相关问题的深入理解与探索。
一、引言
细胞氧化应激是指细胞内活性氧(ROS)产生与清除失衡,过量的 ROS 会攻击细胞内生物大分子,如脂质、蛋白质和核酸,导致细胞损伤和功能障碍。SOD 作为细胞内重要的抗氧化酶,能催化超氧阴离子自由基发生歧化反应,生成氧气和过氧化氢,从而维持细胞内 ROS 稳态。准确测定 SOD 活性对于研究细胞氧化应激机制、开发抗氧化治疗策略具有重要意义。CheKine 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒的出现,为该领域研究提供了高效工具。
二、材料与方法
1.细胞系:选用人肝癌细胞系 HepG2 和小鼠成纤维细胞系 NIH/3T3。
1.氧化应激诱导:采用不同浓度的过氧化氢溶液(0.1 - 1 mM)处理细胞 2 小时,或用紫外线照射(20 J/m²)细胞模拟氧化应激环境。
1.样本处理:收集处理后的细胞,用试剂盒提供的细胞裂解液裂解细胞,4℃、12000 rpm 离心 15 分钟,取上清用于 SOD 活性检测。
1.检测过程:按照 CheKine 试剂盒说明书,将细胞裂解上清与试剂 A、试剂 B 等依次混合,在 37℃孵育 20 分钟,使用酶标仪在 550 nm 波长下测定吸光度。通过标准曲线计算 SOD 活性。
三、结果与分析
1.氧化应激对 SOD 活性影响:随着过氧化氢浓度增加或紫外线照射,两种细胞系内 SOD 活性呈现先升高后降低的趋势。在 0.5 mM 过氧化氢处理时,HepG2 细胞 SOD 活性较对照组升高约 50%,但 1 mM 过氧化氢处理后,SOD 活性显著下降。这表明细胞在轻度氧化应激时可诱导 SOD 表达以抵御损伤,但重度氧化应激会导致 SOD 活性受抑制。
1.试剂盒性能验证:对同一样本重复检测 5 次,SOD 活性测定结果的变异系数小于 5%,显示出良好的重复性。与经典的黄嘌呤氧化酶法测定结果对比,相关性分析显示两者具有高度相关性(r > 0.98),证明该试剂盒准确性高。
四、结论
CheKine 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒在细胞氧化应激研究中表现卓越,能精确测定 SOD 活性,为揭示细胞氧化应激损伤与修复机制提供有力支持,有助于筛选和开发有效的抗氧化剂用于细胞保护。
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