正确的样本保存方法是实验成功的关键，因为不当的保存技术可能会导致样本变质或受损。我们深知，在实验开展前，如何妥善保存细胞、组织、植物和细菌等各类样本，是众多研究者面临的一大难题和学习重点。因此，我们将深入讨论并分享不同样本的处理与保存策略，期望能为您提供有益的参考。
一、细胞样本保存
01悬浮细胞
• 首先，将细胞及其培养液一并收集至15ml或50ml的离心管中，以1500rpm的速度离心3分钟，随后弃去上清液。
• 接着，加入PBS缓冲液轻轻吹打细胞，再次以1500rpm离心3分钟，弃去上清。
• 此过程重复三次后，弃去上清液，将细胞样本置于-80℃冰箱或液氮中冻存以备后续使用。
02贴壁细胞
• 对于贴壁细胞，首先使用胰酶进行消化，将消化后的细胞收集至离心管中，以1500rpm离心3分钟，弃去上清。
• 随后，加入PBS缓冲液轻轻吹打，再次离心并弃去上清，此步骤重复三次。
• 最后，将处理好的细胞样本置于-80℃或液氮中冻存。
03特殊细胞
• 对于某些对胰酶敏感或实验有特殊要求的细胞（如E-Cadherin），可采用细胞刮子直接刮取细胞。
• 将刮取的细胞收集至离心管中，按照上述离心、洗涤步骤处理，最后冻存。
二、动物组织样本保存
• 取下所需组织样本后，立即使用预冷的PBS或生理盐水进行漂洗，以去除残留血液。
• 用滤纸吸干多余液体后，将组织分割成约100mg的小块（根据实验需求调整），分别用锡纸包裹或装入冻存管中，置于-80℃或液氮中保存。
三、植物样本保存
• 获取植物样本后，使用蒸馏水洗净泥土，再用滤纸吸干多余水分。
• 将植物样本分装成适当大小，置于-80℃或液氮中保存。
四、细菌样本保存
• 细菌培养完成后，以10000rpm的速度离心5分钟收集细菌。
• 加入PBS缓冲液吹打细菌，再次离心并弃去上清，此步骤重复三次。
• 最后，将处理好的细菌样本置于-80℃或液氮中冻存。
特别提示
1. 若需检测磷酸化蛋白，建议从新鲜样本中提取蛋白，并加入Loading buffer煮沸10分钟。短期内使用可置于-20℃保存，长期保存则需置于-80℃。请注意，样本应在3个月内进行检测，以避免磷酸化蛋白去磷酸化而影响检测结果。
2. 提取胞浆、核蛋白时，应优先选择新鲜样本，以减少冻存对核蛋白含量的影响。
3. 存放在-80℃或液氮中的样本应避免反复冻融，应尽早进行测试以保持样本的完整性。
4. 长途运输样本时，应使用干冰或液氮保持低温环境，以确保样本的稳定性。