在科研实验中,伙伴们时常需评估细胞增殖的状态,譬如探究某个基因对细胞生长的调控作用,或是验证抗癌药物的有效性。小伙伴们,别再向师兄师姐求救了,这里为你汇总了细胞增殖检测的全方位攻略!
一、Brdu/EdU 标记技术
5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu),作为胸腺嘧啶的“替身演员”,在DNA合成的“戏剧”中替代主角出场。为了吸引目光,它还披上了特异性抗体的“华丽外衣”,在免疫荧光或流式细胞术的“闪光灯”下显露真身,揭示其参与DNA合成的“戏份”。
EdU(5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷)则是另一位“替身B”,同样能在细胞增殖时“潜入”DNA复制现场,与Apollo荧光染料联手,迅速揭示细胞DNA的复制活跃度。这项技术广泛适用于细胞增殖、分化、生长发育、DNA修复、病毒复制及细胞追踪等领域,是药物筛选实验的得力助手。
二、MTT/CCK-8 测定法
噻唑蓝(MTT),昵称“蓝小姐”,在细胞活力检测中扮演着关键角色。她牺牲自我,与线粒体内的脱氢酶“共舞”,若脱氢酶活跃,则“蓝小姐”变身兰紫色甲瓒,沉积于活细胞内。随后,二甲基亚砜(DMSO)溶解甲瓒,通过酶标仪在490nm波长下的读数,即可间接反映活细胞的数量。
CCK-8作为MTT的升级版,内含WST-8成分,与MTT相似却更胜一筹。在电子耦合剂的助力下,它同样能揭示脱氢酶的活性,生成橙黄色甲瓒,颜色深浅与细胞增殖情况成正比,450nm波长下测定光吸收值,即可轻松评估细胞活力。
三、CFSE 荧光标记法
羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE),一种穿透细胞膜的荧光染料,与细胞内的氨基结合后,成为细胞蛋白质的“标签”。细胞分裂时,CFSE荧光均匀分配给子细胞,荧光强度逐级递减。利用流式细胞仪的488nm激发光,即可追踪细胞增殖的轨迹。
四、Ki67 核抗原染色技术
Ki67染色,瞄准了细胞周期中除G0期外的所有活跃增殖细胞。它如同一个“增值探测器”,帮助科研人员评估药物或化合物的促增殖或抗增殖效果。无论是免疫组化还是流式细胞术,都能轻松捕捉到这些增殖细胞的身影。
五、3H-TdR 掺入技术
3H标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR),作为DNA合成的“追踪器”,能嵌入新合成的DNA链中。通过液体闪烁计数器的检测,每条带有3H标记的DNA链都如同被点亮,揭示了细胞DNA的代谢状态和增殖情况。这项技术敏感度高、客观性强,但设备成本和放射性污染问题也不容忽视。
六、微型活细胞观测系统
传统细胞实验方法往往只能捕捉特定时间点的细胞状态,而微型活细胞观测系统则打破了这一局限。它小巧便携,可置于培养箱内,对活细胞进行长时间、连续的动态监测。通过高清物镜和AI智能分析,实时记录细胞生长、分裂的全过程,生成细胞生长曲线,为细胞研究提供了全新的视角。
七、实时无标记细胞分析技术(RTCA)
RTCA技术,是安捷伦推出的活细胞分析利器。它巧妙地将微电极阵列嵌入细胞培养板底部,构建了一个实时、动态的细胞阻抗检测系统。当细胞在电极表面生长、形态变化时,会改变电极界面的阻抗,这种变化与细胞的生理功能紧密相关。通过实时监测电极阻抗,即可获取细胞生长、伸展、形态变化等全面信息,为细胞研究开辟了新途径。
一、Brdu/EdU 标记技术
5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu),作为胸腺嘧啶的“替身演员”,在DNA合成的“戏剧”中替代主角出场。为了吸引目光,它还披上了特异性抗体的“华丽外衣”,在免疫荧光或流式细胞术的“闪光灯”下显露真身,揭示其参与DNA合成的“戏份”。
EdU(5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷)则是另一位“替身B”,同样能在细胞增殖时“潜入”DNA复制现场,与Apollo荧光染料联手,迅速揭示细胞DNA的复制活跃度。这项技术广泛适用于细胞增殖、分化、生长发育、DNA修复、病毒复制及细胞追踪等领域,是药物筛选实验的得力助手。
二、MTT/CCK-8 测定法
噻唑蓝(MTT),昵称“蓝小姐”,在细胞活力检测中扮演着关键角色。她牺牲自我,与线粒体内的脱氢酶“共舞”,若脱氢酶活跃,则“蓝小姐”变身兰紫色甲瓒,沉积于活细胞内。随后,二甲基亚砜(DMSO)溶解甲瓒,通过酶标仪在490nm波长下的读数,即可间接反映活细胞的数量。
CCK-8作为MTT的升级版,内含WST-8成分,与MTT相似却更胜一筹。在电子耦合剂的助力下,它同样能揭示脱氢酶的活性,生成橙黄色甲瓒,颜色深浅与细胞增殖情况成正比,450nm波长下测定光吸收值,即可轻松评估细胞活力。
三、CFSE 荧光标记法
羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE),一种穿透细胞膜的荧光染料,与细胞内的氨基结合后,成为细胞蛋白质的“标签”。细胞分裂时,CFSE荧光均匀分配给子细胞,荧光强度逐级递减。利用流式细胞仪的488nm激发光,即可追踪细胞增殖的轨迹。
四、Ki67 核抗原染色技术
Ki67染色,瞄准了细胞周期中除G0期外的所有活跃增殖细胞。它如同一个“增值探测器”,帮助科研人员评估药物或化合物的促增殖或抗增殖效果。无论是免疫组化还是流式细胞术,都能轻松捕捉到这些增殖细胞的身影。
五、3H-TdR 掺入技术
3H标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR),作为DNA合成的“追踪器”,能嵌入新合成的DNA链中。通过液体闪烁计数器的检测,每条带有3H标记的DNA链都如同被点亮,揭示了细胞DNA的代谢状态和增殖情况。这项技术敏感度高、客观性强,但设备成本和放射性污染问题也不容忽视。
六、微型活细胞观测系统
传统细胞实验方法往往只能捕捉特定时间点的细胞状态,而微型活细胞观测系统则打破了这一局限。它小巧便携,可置于培养箱内,对活细胞进行长时间、连续的动态监测。通过高清物镜和AI智能分析,实时记录细胞生长、分裂的全过程,生成细胞生长曲线,为细胞研究提供了全新的视角。
七、实时无标记细胞分析技术(RTCA)
RTCA技术,是安捷伦推出的活细胞分析利器。它巧妙地将微电极阵列嵌入细胞培养板底部,构建了一个实时、动态的细胞阻抗检测系统。当细胞在电极表面生长、形态变化时,会改变电极界面的阻抗,这种变化与细胞的生理功能紧密相关。通过实时监测电极阻抗,即可获取细胞生长、伸展、形态变化等全面信息,为细胞研究开辟了新途径。