水平核酸电泳槽及配套产品介绍
水平核酸电泳槽：主要部分是一个水平放置的槽体，有两个电极（阳极和阴极），用于提供电场。槽内可放置凝胶，使核酸样品在凝胶平面上进行电泳。
配套产品：包括梳子（用于在凝胶上形成加样孔）、电泳缓冲液、琼脂糖或其他凝胶材料、核酸染料、上样缓冲液和电源（电泳仪）等。
使用前准备
清洗和检查
用蒸馏水清洗电泳槽，确保槽内没有杂质和残留的旧缓冲液。检查槽体是否有裂缝或损坏，电极是否干净、无腐蚀。
检查梳子的齿是否整齐，没有弯曲或损坏的情况。
配制电泳缓冲液
根据实验要求选择合适的缓冲液，如 TAE（Tris - 醋酸 - EDTA）或 TBE（Tris - 硼酸 - EDTA）。以 TAE 缓冲液为例，通常配制 50× 的浓缩液，使用时稀释到 1× 工作浓度。配制好后倒入电泳槽，使缓冲液的液面略高于凝胶放置后的高度。
制备凝胶（以琼脂糖凝胶为例）
根据需要分离的核酸片段大小确定琼脂糖凝胶的浓度。例如，分离较大的 DNA 片段（1 - 20kb），可使用 1% - 1.5% 的琼脂糖凝胶。
称取适量的琼脂糖粉末放入三角烧瓶中，加入适量的电泳缓冲液（如 1×TAE），在微波炉中加热使琼脂糖完全溶解。加热过程中要不时搅拌，防止液体溢出。
待琼脂糖溶液冷却到 50 - 60℃左右，加入核酸染料（如溴化乙锭，终浓度为 0.5μg/mL 左右；如果使用相对安全的 GelRed，按照说明书加入适量），充分混匀后倒入已放置好梳子的水平电泳槽内，等待凝胶凝固。凝胶凝固时间大约为 20 - 30 分钟。
加样过程
准备样品
核酸样品应确保已提取和纯化，去除杂质。将核酸样品与上样缓冲液混合，上样缓冲液一般含有甘油或蔗糖以增加样品密度，还含有示踪染料（如溴酚蓝）。通常上样缓冲液与样品的体积比为 1:5 - 1:10。
加样操作
凝胶凝固后，小心地拔出梳子，形成加样孔。使用微量移液器吸取样品，将移液器枪头垂直插入加样孔底部，缓慢释放样品，避免产生气泡。注意每个加样孔的样品量要适当，根据核酸的浓度和实验目的调整，一般 DNA 样品上样量在 0.5 - 10μg 之间。
电泳操作
连接电源
将电泳槽的电极与电泳仪正确连接，一般阳极（红色插头）连接到电泳槽的正极端，阴极（黑色插头）连接到负极端。
设置参数并开始电泳
根据核酸片段大小和凝胶浓度设置合适的电压和时间。对于琼脂糖凝胶电泳，电压通常在 80 - 120V 之间。电泳时间取决于核酸片段大小和分离要求，例如，分离较小的 DNA 片段（小于 1kb）可能需要 30 - 45 分钟，而分离较大片段（大于 10kb）可能需要 1 - 2 小时。开启电泳仪，开始电泳。
在电泳过程中，可以观察示踪染料的迁移情况来判断电泳进度。溴酚蓝的迁移速度大致相当于双链 DNA 片段大小为 300 - 400bp 的迁移速度。
结果观察与分析
观察电泳结果（如果凝胶中未加染料，需要染色）
如果使用不含核酸染料的凝胶，电泳结束后需要对凝胶进行染色。将凝胶放入含有核酸染料的染色液中，染色时间根据染料种类和核酸含量而定，如溴化乙锭染色 10 - 15 分钟左右。
将染色后的凝胶放在凝胶成像系统中，调整合适的曝光时间等参数，观察核酸条带的位置、亮度和形状。
分析结果
根据核酸条带与已知分子量的 DNA Marker（标准分子量参照物）的位置比较，估算核酸样品的片段大小。通过条带的亮度可以大致比较核酸的相对含量，不过要注意不同核酸序列结合染料的能力可能有差异。观察条带形状是否规则，拖尾或弥散现象可能是由于核酸样品降解、杂质干扰、核酸浓度过高或凝胶不均匀等原因导致。
水平核酸电泳槽：主要部分是一个水平放置的槽体，有两个电极（阳极和阴极），用于提供电场。槽内可放置凝胶，使核酸样品在凝胶平面上进行电泳。
配套产品：包括梳子（用于在凝胶上形成加样孔）、电泳缓冲液、琼脂糖或其他凝胶材料、核酸染料、上样缓冲液和电源（电泳仪）等。
使用前准备
清洗和检查
用蒸馏水清洗电泳槽，确保槽内没有杂质和残留的旧缓冲液。检查槽体是否有裂缝或损坏，电极是否干净、无腐蚀。
检查梳子的齿是否整齐，没有弯曲或损坏的情况。
配制电泳缓冲液
根据实验要求选择合适的缓冲液，如 TAE（Tris - 醋酸 - EDTA）或 TBE（Tris - 硼酸 - EDTA）。以 TAE 缓冲液为例，通常配制 50× 的浓缩液，使用时稀释到 1× 工作浓度。配制好后倒入电泳槽，使缓冲液的液面略高于凝胶放置后的高度。
制备凝胶（以琼脂糖凝胶为例）
根据需要分离的核酸片段大小确定琼脂糖凝胶的浓度。例如，分离较大的 DNA 片段（1 - 20kb），可使用 1% - 1.5% 的琼脂糖凝胶。
称取适量的琼脂糖粉末放入三角烧瓶中，加入适量的电泳缓冲液（如 1×TAE），在微波炉中加热使琼脂糖完全溶解。加热过程中要不时搅拌，防止液体溢出。
待琼脂糖溶液冷却到 50 - 60℃左右，加入核酸染料（如溴化乙锭，终浓度为 0.5μg/mL 左右；如果使用相对安全的 GelRed，按照说明书加入适量），充分混匀后倒入已放置好梳子的水平电泳槽内，等待凝胶凝固。凝胶凝固时间大约为 20 - 30 分钟。
加样过程
准备样品
核酸样品应确保已提取和纯化，去除杂质。将核酸样品与上样缓冲液混合，上样缓冲液一般含有甘油或蔗糖以增加样品密度，还含有示踪染料（如溴酚蓝）。通常上样缓冲液与样品的体积比为 1:5 - 1:10。
加样操作
凝胶凝固后，小心地拔出梳子，形成加样孔。使用微量移液器吸取样品，将移液器枪头垂直插入加样孔底部，缓慢释放样品，避免产生气泡。注意每个加样孔的样品量要适当，根据核酸的浓度和实验目的调整，一般 DNA 样品上样量在 0.5 - 10μg 之间。
电泳操作
连接电源
将电泳槽的电极与电泳仪正确连接，一般阳极（红色插头）连接到电泳槽的正极端，阴极（黑色插头）连接到负极端。
设置参数并开始电泳
根据核酸片段大小和凝胶浓度设置合适的电压和时间。对于琼脂糖凝胶电泳，电压通常在 80 - 120V 之间。电泳时间取决于核酸片段大小和分离要求，例如，分离较小的 DNA 片段（小于 1kb）可能需要 30 - 45 分钟，而分离较大片段（大于 10kb）可能需要 1 - 2 小时。开启电泳仪，开始电泳。
在电泳过程中，可以观察示踪染料的迁移情况来判断电泳进度。溴酚蓝的迁移速度大致相当于双链 DNA 片段大小为 300 - 400bp 的迁移速度。
结果观察与分析
观察电泳结果（如果凝胶中未加染料，需要染色）
如果使用不含核酸染料的凝胶，电泳结束后需要对凝胶进行染色。将凝胶放入含有核酸染料的染色液中，染色时间根据染料种类和核酸含量而定，如溴化乙锭染色 10 - 15 分钟左右。
将染色后的凝胶放在凝胶成像系统中，调整合适的曝光时间等参数，观察核酸条带的位置、亮度和形状。
分析结果
根据核酸条带与已知分子量的 DNA Marker（标准分子量参照物）的位置比较，估算核酸样品的片段大小。通过条带的亮度可以大致比较核酸的相对含量，不过要注意不同核酸序列结合染料的能力可能有差异。观察条带形状是否规则，拖尾或弥散现象可能是由于核酸样品降解、杂质干扰、核酸浓度过高或凝胶不均匀等原因导致。
