光学显微成像,通常也称“光学显微成像技术”或“光学显微术”(Optical Microscopy,或Light Microscopy),是指透过样品或从样品反射回来的可见光,通过一个或多个透镜后,能够得到微小样品的放大图像的技术。以下是对光学显微成像方案的详细阐述:
一、基本原理
光学显微成像技术主要基于光学成像的折射和放大原理。具体来说,该技术通过两组会聚透镜(物镜和目镜)组成的光学折射成像系统,将肉眼所不能分辨的微小物体放大成像,以供人们观察和分析。当光线从一种介质进入另一种介质时(如从空气进入玻璃透镜),光线的传播方向会发生改变,这就是光的折射现象。在光学显微镜中,物镜和目镜都利用了这一原理来放大和成像。
二、成像过程
物镜成像:物镜是靠近观察物的透镜组,其焦距较短。当光线通过物镜时,会发生折射,使物体在物镜的后方形成一个倒立、放大的实像。这个实像的位置位于物镜的焦点附近,但不在焦点上。
目镜成像:目镜是靠近眼睛的透镜组,其焦距较长。物镜形成的实像再经过目镜的放大作用,形成一个正立、放大的虚像。这个虚像位于人眼的明视距离处(通常规定为25厘米),使得观察者能够清晰地看到放大的物体图像。
三、照明方式
明场照明:明场照明是光学显微术中最简单的一种方式。在倒置显微镜中,只需采用白光从样品下方照射,在样品上方观察透射光即可。图像对比度取决于样品不同部位对光的吸收。采用这种方式最大的缺点是大多数生物样品的对比度都很低,并且会由于离焦信息的干扰导致分辨率也较低。但优点是设备简单,样品也无需进行繁琐的处理。
斜照明:相比明场照明,斜照明方式的优点是能够使样品的图像产生一种三维(3D)的效果,从而凸显出样品中一些原本看不到的结构。但采用斜照明方式并不能显著提高对比度和分辨率。
暗场照明:暗场显微术通过采集样品散射的光线来提高无色透明样品的图像对比度。为了只收集样品的散射光,暗场照明方式需要采用准直光源使进入像平面的透射光(未散射的部分)强度降到最低。相比另外两种方式,采用这种照明方式的技术其缺点主要在于光强较弱导致的成像时间过长。
莱因伯格照明:莱因伯格照明(Rheinberg Illumination)方式是暗场照明的一种特殊变体。其主要区别通过在聚光器之前插入彩色的透明滤光片,从而可以用颜色来区分样品中不同空间的成分。

http://www.oimtt.com.cn/prolist_t49.html
一、基本原理
光学显微成像技术主要基于光学成像的折射和放大原理。具体来说,该技术通过两组会聚透镜(物镜和目镜)组成的光学折射成像系统,将肉眼所不能分辨的微小物体放大成像,以供人们观察和分析。当光线从一种介质进入另一种介质时(如从空气进入玻璃透镜),光线的传播方向会发生改变,这就是光的折射现象。在光学显微镜中,物镜和目镜都利用了这一原理来放大和成像。
二、成像过程
物镜成像:物镜是靠近观察物的透镜组,其焦距较短。当光线通过物镜时,会发生折射,使物体在物镜的后方形成一个倒立、放大的实像。这个实像的位置位于物镜的焦点附近,但不在焦点上。
目镜成像:目镜是靠近眼睛的透镜组,其焦距较长。物镜形成的实像再经过目镜的放大作用,形成一个正立、放大的虚像。这个虚像位于人眼的明视距离处(通常规定为25厘米),使得观察者能够清晰地看到放大的物体图像。
三、照明方式
明场照明:明场照明是光学显微术中最简单的一种方式。在倒置显微镜中,只需采用白光从样品下方照射,在样品上方观察透射光即可。图像对比度取决于样品不同部位对光的吸收。采用这种方式最大的缺点是大多数生物样品的对比度都很低,并且会由于离焦信息的干扰导致分辨率也较低。但优点是设备简单,样品也无需进行繁琐的处理。
斜照明:相比明场照明,斜照明方式的优点是能够使样品的图像产生一种三维(3D)的效果,从而凸显出样品中一些原本看不到的结构。但采用斜照明方式并不能显著提高对比度和分辨率。
暗场照明:暗场显微术通过采集样品散射的光线来提高无色透明样品的图像对比度。为了只收集样品的散射光,暗场照明方式需要采用准直光源使进入像平面的透射光(未散射的部分)强度降到最低。相比另外两种方式,采用这种照明方式的技术其缺点主要在于光强较弱导致的成像时间过长。
莱因伯格照明:莱因伯格照明(Rheinberg Illumination)方式是暗场照明的一种特殊变体。其主要区别通过在聚光器之前插入彩色的透明滤光片,从而可以用颜色来区分样品中不同空间的成分。

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