判断抗体偶联成功的方法有多种,以下是几种常见的检测方法:1. 生物素-亲和素法(Biotin-Avidin System):将抗体的氨基末端与生物素进行连接,再将生物素与亲和素的结合位点进行连接。如果抗体已偶联成功,则能够通过加入酶标记的亲和素催化底物显色反应来判断。2. 对氨基苯磺酸法和异硫氰酸荧光黄/罗丹明6G法等直接观察荧光染色的效果比较简单、直观。此外还可以采用薄层层析和高效液相层析对多糖组分进行分析比对,确定是否偶联上抗体;另外还可用免疫电泳分析法来检查抗原或抗体被偶联后其原有的带电荷性及分子量的大小有无改变来确定偶联情况。以上三种方法是应用最广泛的间接化学发光技术中最常用的检测手段之一。