制作蛋白标曲时，需要注意以下几个问题：1.标准蛋白的选择：应根据实验的需要和相关文献，选择适合的标准蛋白。2.蛋白标准品的制备：标准品应按照制备方法进行制备，尽量避免去噪和其他干扰。3.标准品的浓度选择：标准品的浓度应适当，不宜过高过低。4.标准品的稀释：需要进行一定的稀释，避免高浓度的标准品造成干扰。5.标准品的保存：应该在制备好的标准品中加入一定量的抑制剂进行保存，避免其分解和变质。6.实验环境：实验室的环境应该干净整洁，避免产生其他干扰。