您好：1 试验材料供试材料主要由中国农业科学院蔬菜花卉所牡丹资源圃提供，采用人工授粉，父母本选取花型优美、花色丰富的牡丹品种。选用中原牡丹品种群与日本牡丹品种群进行正反交，花色须有差别。常用日本品种有新日月、皇嘉门、太阳、大正之光等。中原品种有凤丹、百园红霞、姊妹游春、黄金翠等。2 试验操作套袋为了防止短时间开放后自花或异花授粉，可选用信封或者硫酸纸袋进行套袋。套袋宜选在园桃透色期且为松苞的花朵，要求花苞还未展开，花药还未开裂散粉。纸袋要撑开而不紧挨柱头，以防柱头上分泌黏液粘到袋子上，纸袋封口要严密，最后用回形针封口（注意花茎与纸袋口间不要留缝隙，防止昆虫爬入传播花粉）套袋上注明套袋日期及所选花朵状态。母本人工去雄操作前，须用酒精喷洒手指及可能接触雄蕊的部分，待酒精挥发完之后再开始试验。花朵中雄蕊较发达的，可用手直接取下，较小的雄蕊需用镊子小心夹出，最后轻抖花朵，防止花瓣间残留雄蕊，注意操作过程中不要伤及基盘如花瓣过多，也可以摘去一部分花瓣，而如果雄蕊瓣化情况严重，也不可将花瓣全部摘下，否则会影响结实。3 晾花粉雄蕊采后用报纸或信封包裹（吸湿透气）。过早采粉则花药贮存营养不够，不易开裂散粉；过晚则花粉已散出，易受其他花粉污染。包裹袋上注明品种名称及采粉日期。采后尽快置于室内无风吹、无阳光直射的地方，在报纸上摊平晾干并注明品种及晾粉日期。晾粉以24 h 为宜，若迟迟不散粉，则最长可晾7 d。4 筛花粉观察花丝，确定花丝已干燥，并有花粉散出时，倒入目筛中将花粉筛下，储存于离心管中，管内用硅胶隔离每层花粉，且上下2 层须是硅胶（防潮），在离心管盖及标签纸上注明品种和收粉的日期，放入冰箱冷冻室（-20 ℃）保存，以备授粉。5 杂交授粉雌蕊柱头分泌的黏液发亮时即可授粉，于10：00 以前或16：00 后进行。用毛笔饱蘸已干燥并充分混合的花粉，抹于母本雌蕊新鲜的柱头上，每天1 次，共2 次。授粉后挂牌，注明父母本及授粉日期。注意：花粉不用时要放在放有冰块的冰盒里以防止高温降低花粉活力；尽量减少花粉在自然条件下暴露的时间；父本品种更换时，操作者的手及毛笔需用酒精喷洒，待酒精挥发后进行后续操作。6 杂交后管理为了防止昆虫随意传粉，采取母本花朵套袋的方法。经过2 次授粉后，雌蕊产生的花粉传到柱头上，会使子房里的胚珠受精。一般授粉7 d 后即可去袋，观察果实的发育情况，如摘除不及时，有时会因阴雨而造成雌蕊霉烂。花枝上的小纸挂牌要等到果实成熟后才能取下。