《蒙娜丽莎》的背景是山崖、小径、石桥、树丛与潺潺的流水。达·芬奇出生在距意大利阿雷佐市约100千米的小镇，并曾经在阿雷佐市生活过，这一地区的原始景观与《蒙娜丽莎》的背景几乎完全一样，因此，加利福尼亚大学教授卡罗·佩德雷蒂认为，蒙娜丽莎身后的背景是阿雷佐市市里阿诺桥附近的景色，达·芬奇可能采用这一地区的田园景色作为《蒙娜丽莎》的背景，许多美术史专家都对他的研究结果表示认同