钙黄绿素是一种钙依赖型荧光分子。它主要用于研究体内条件下的骨代谢，并有助于在 体外条件下对凹陷区域进行染色。钙黄绿素被用于钙的荧光测定以及钙的EDTA（乙二胺四乙酸）滴定。跟着百萤来一起探索钙黄绿素的相关问题吧！
问：什么是钙黄绿素？
答：钙黄绿素通常用乙酰氧基甲基酯（例如钙黄绿素 AM）进行修饰以促进膜通透性，并广泛用作检测活细胞的活力指示剂。 它与几种药物相关的测定有关，包括细胞毒性、氧化功能和神经毒性。
问：钙黄绿素,AM如何工作？
答：钙黄绿素 AM 是钙黄绿素的乙酰甲氧基衍生物，是一种可透过膜的荧光酯酶底物，用于测定细胞活力和膜完整性。 钙黄绿素 AM 的亲脂性使其能够自由扩散穿过细胞膜并渗透到活细胞的胞质溶胶中。 进入细胞后，非特异性细胞内酯酶会酶促去除 AM 基团，由此产生的去酯化钙黄绿素产物会被困在细胞内。 在蓝光激发下，钙黄绿素在 521 nm 处发出明亮的绿色荧光。 钙黄绿素的荧光强度与细胞酯酶的活性和样品中存在的活细胞数量成正比。
问：钙黄绿素,AM 有毒吗？
答：钙黄绿素AM的SDS表明它是一种无害物质或混合物。在生命科学和药物发现研究中，钙黄绿素AM由于其相对较低的细胞毒性，通常用于研究酶活性、细胞活力、膜完整性和长期细胞追踪。然而，对于特定的细胞系和实验条件，高浓度的钙黄绿素AM已被证明对细胞具有毒性。
问：钙黄绿素AM是荧光的吗？
答：不，钙黄绿素 AM 是一种非荧光酯酶底物。 然而，在活细胞中，钙黄绿素 AM 可以被动地穿过细胞膜并进入胞质溶胶，从而使非特异性细胞内酯酶水解来自钙黄绿素 AM 的乙酰氧基甲酯，从而产生高荧光钙黄绿素产物。 钙黄绿素分别在 501 nm 和 521 nm 处具有激发和发射峰，并在激发时产生强烈的绿色荧光。 测得的信号强度与起作用的细胞酯酶的活性和存在的活细胞数量成正比。
问：钙黄绿素AM 可以在细胞中持续多久？
答：钙黄绿素是一种疏水性化合物，可以在具有完整质膜的活细胞中保留数小时至数天，具体取决于细胞类型、细胞形态或实验条件。 在 Miles 等人于 2016 年进行的基于细胞的测定中，载有钙黄绿素 AM 的前列腺癌细胞在 0.5、2、6、12、24 和 36 小时标记处成像。 在 36 小时标记处，细胞仍然发出适度的荧光； 然而，背景荧光有所增加（见图片）。 增加的原因之一是有机阴离子转运蛋白 (OAT) 对钙黄绿素的挤压，OAT 在调节阴离子平衡方面起着关键作用。 Probenecid 是一种 OAT 抑制剂，可以添加到钙黄绿素 AM 工作溶液中，以提高去酯化钙黄绿素在细胞内的保留并减少干扰。
问：钙黄绿素AM在染色后可以固定吗？
答：不能，无论使用何种固定方法 - 醛或甲醇固定 - 用钙黄绿素 AM 染色的细胞都会失去其染色效果。 此外，钙黄绿素 AM 不能用于固定细胞，因为它们缺乏将钙黄绿素 AM 转化为钙黄绿素所需的酯酶以及保留染料所需的膜完整性。 钙黄绿素 AM 是一种荧光酯酶底物，只能用于活细胞以确定细胞活力。如需此类实验，请千万注意！
问：钙黄绿素AM能染色细菌吗？
答：钙黄绿素 AM 染色不仅适用于真核生物样品，还可用于确定细菌样品中的细胞活力。 Calcein AM 适用于检测许多活的革兰氏阴性细菌菌株，可用于微生物学研究、环境监测、药物无菌检测以及食品和植物评估技术。 与真核细胞一样，细菌在其细胞质中含有微生物酯酶，可以裂解钙黄绿素 AM 的亲脂性封闭基团并将其转化为荧光钙黄绿素。 可以使用荧光仪器测量信号，其强度与存在的活细菌数量成正比。
问：什么是钙黄绿素？
答：钙黄绿素通常用乙酰氧基甲基酯（例如钙黄绿素 AM）进行修饰以促进膜通透性，并广泛用作检测活细胞的活力指示剂。 它与几种药物相关的测定有关，包括细胞毒性、氧化功能和神经毒性。
问：钙黄绿素,AM如何工作？
答：钙黄绿素 AM 是钙黄绿素的乙酰甲氧基衍生物，是一种可透过膜的荧光酯酶底物，用于测定细胞活力和膜完整性。 钙黄绿素 AM 的亲脂性使其能够自由扩散穿过细胞膜并渗透到活细胞的胞质溶胶中。 进入细胞后，非特异性细胞内酯酶会酶促去除 AM 基团，由此产生的去酯化钙黄绿素产物会被困在细胞内。 在蓝光激发下，钙黄绿素在 521 nm 处发出明亮的绿色荧光。 钙黄绿素的荧光强度与细胞酯酶的活性和样品中存在的活细胞数量成正比。
问：钙黄绿素,AM 有毒吗？
答：钙黄绿素AM的SDS表明它是一种无害物质或混合物。在生命科学和药物发现研究中，钙黄绿素AM由于其相对较低的细胞毒性，通常用于研究酶活性、细胞活力、膜完整性和长期细胞追踪。然而，对于特定的细胞系和实验条件，高浓度的钙黄绿素AM已被证明对细胞具有毒性。
问：钙黄绿素AM是荧光的吗？
答：不，钙黄绿素 AM 是一种非荧光酯酶底物。 然而，在活细胞中，钙黄绿素 AM 可以被动地穿过细胞膜并进入胞质溶胶，从而使非特异性细胞内酯酶水解来自钙黄绿素 AM 的乙酰氧基甲酯，从而产生高荧光钙黄绿素产物。 钙黄绿素分别在 501 nm 和 521 nm 处具有激发和发射峰，并在激发时产生强烈的绿色荧光。 测得的信号强度与起作用的细胞酯酶的活性和存在的活细胞数量成正比。
问：钙黄绿素AM 可以在细胞中持续多久？
答：钙黄绿素是一种疏水性化合物，可以在具有完整质膜的活细胞中保留数小时至数天，具体取决于细胞类型、细胞形态或实验条件。 在 Miles 等人于 2016 年进行的基于细胞的测定中，载有钙黄绿素 AM 的前列腺癌细胞在 0.5、2、6、12、24 和 36 小时标记处成像。 在 36 小时标记处，细胞仍然发出适度的荧光； 然而，背景荧光有所增加（见图片）。 增加的原因之一是有机阴离子转运蛋白 (OAT) 对钙黄绿素的挤压，OAT 在调节阴离子平衡方面起着关键作用。 Probenecid 是一种 OAT 抑制剂，可以添加到钙黄绿素 AM 工作溶液中，以提高去酯化钙黄绿素在细胞内的保留并减少干扰。
问：钙黄绿素AM在染色后可以固定吗？
答：不能，无论使用何种固定方法 - 醛或甲醇固定 - 用钙黄绿素 AM 染色的细胞都会失去其染色效果。 此外，钙黄绿素 AM 不能用于固定细胞，因为它们缺乏将钙黄绿素 AM 转化为钙黄绿素所需的酯酶以及保留染料所需的膜完整性。 钙黄绿素 AM 是一种荧光酯酶底物，只能用于活细胞以确定细胞活力。如需此类实验，请千万注意！
问：钙黄绿素AM能染色细菌吗？
答：钙黄绿素 AM 染色不仅适用于真核生物样品，还可用于确定细菌样品中的细胞活力。 Calcein AM 适用于检测许多活的革兰氏阴性细菌菌株，可用于微生物学研究、环境监测、药物无菌检测以及食品和植物评估技术。 与真核细胞一样，细菌在其细胞质中含有微生物酯酶，可以裂解钙黄绿素 AM 的亲脂性封闭基团并将其转化为荧光钙黄绿素。 可以使用荧光仪器测量信号，其强度与存在的活细菌数量成正比。
