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有没有大佬帮我看看pcr这个条带问题
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梦魇的白菜
多孔动物
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最近在做细菌的pcr,自从换了一个taq酶的mix之后,跑出来的条带就是这样的,都是抹带,就算有,也只有那一点点,然后上下都是抹带。第一个图是我之前的,第二个是我这几次的,这是为什么呀,pcr体系我是94预变形2m,然后94变性40s,58退火30s,72延伸1.40min,最后延伸10min,请问一下为什么呢。第二个图我就是给预变形提高到了5min,别的都没变。图在评论区
孩子要哭了
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IP属地:浙江
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1楼
2022-06-13 15:03
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梦魇的白菜
多孔动物
5
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这两个图就是最近跑的,有的条带亮,有的特别暗,都有很严重的抹带,要么就没有条带,都是抹带
IP属地:浙江
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2楼
2022-06-13 15:06
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梦魇的白菜
多孔动物
5
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然后这个是以前的,虽然有一些抹带,但是很少很少,为什么啊
IP属地:浙江
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3楼
2022-06-13 15:06
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叶子红
节肢动物
13
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以前的菌P跑的是否和现在的是同一段目的片段?引物所用的是否相同?我猜测你是因为引物设计不够合理
IP属地:上海
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4楼
2022-06-13 15:13
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柊镜今天吃什么
线形动物
10
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引物降解了
,或者换了酶之后taq酶特异性不好
IP属地:北京
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5楼
2022-06-13 19:37
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To丶雪儿
棘皮动物
14
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好久没看到正经问题了
IP属地:江苏
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6楼
2022-06-15 10:00
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冰原冻土
纽形动物
9
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降低引物浓度、降低菌液浓度、缩短延伸时间。
IP属地:安徽
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7楼
2022-06-15 21:05
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梦魇的白菜
多孔动物
5
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此帖终结,是我mix的问题,换了mix就很完美了
IP属地:浙江
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8楼
2022-06-19 08:48
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