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有没有大佬帮我看看pcr这个条带问题

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最近在做细菌的pcr,自从换了一个taq酶的mix之后,跑出来的条带就是这样的,都是抹带,就算有,也只有那一点点,然后上下都是抹带。第一个图是我之前的,第二个是我这几次的,这是为什么呀,pcr体系我是94预变形2m,然后94变性40s,58退火30s,72延伸1.40min,最后延伸10min,请问一下为什么呢。第二个图我就是给预变形提高到了5min,别的都没变。图在评论区
孩子要哭了


IP属地:浙江来自Android客户端1楼2022-06-13 15:03回复
    这两个图就是最近跑的,有的条带亮,有的特别暗,都有很严重的抹带,要么就没有条带,都是抹带



    IP属地:浙江来自Android客户端2楼2022-06-13 15:06
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      然后这个是以前的,虽然有一些抹带,但是很少很少,为什么啊


      IP属地:浙江来自Android客户端3楼2022-06-13 15:06
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        以前的菌P跑的是否和现在的是同一段目的片段?引物所用的是否相同?我猜测你是因为引物设计不够合理


        IP属地:上海来自Android客户端4楼2022-06-13 15:13
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          引物降解了,或者换了酶之后taq酶特异性不好


          IP属地:北京来自Android客户端5楼2022-06-13 19:37
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            好久没看到正经问题了


            IP属地:江苏来自Android客户端6楼2022-06-15 10:00
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              降低引物浓度、降低菌液浓度、缩短延伸时间。


              IP属地:安徽来自Android客户端7楼2022-06-15 21:05
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                此帖终结,是我mix的问题,换了mix就很完美了



                IP属地:浙江来自Android客户端8楼2022-06-19 08:48
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