多肽的溶解
对于使用多肽的研究人员来说，多肽的溶解是一个主要的难题。每个氨基酸都有其固有化学特性，因此不同的多肽因其氨基酸组成不同、排列顺序不同而具有不同的溶解性。氨基酸按照其亲、疏水性可分为：
亲水性氨基酸：D E H K Q R S T N 羟脯氨酸
疏水性氨基酸：A F I L M P V W Y α-氨基丁酸 β-氨基丙氨酸 正亮氨酸
未定类：GC
在多肽溶解之前请先取小部分进行多肽溶解测试，您可能需要测试几种不同的溶剂，直到找到最适当的一种。
对于亲水性较好的多肽：
１. 短肽和较短的多肽，往往具有较强的亲水性，尤其是二肽或三肽，一般纯水就可以很好的溶解。
２. 亲水性氨基酸平均分配于全部序列，并且序列中含有＞25%的带电氨基酸（EDRHK)和＜25%的疏水性氨基酸，可以用无菌的蒸馏水、去离子水或缓冲溶液溶解（如果条件允许则用无氧水）。
温馨小提示：对于亲水性特别强的序列，可能存在吸潮现象，对此请参考下列方法：
1. 如有冻干条件，请用纯水溶解，重新冻干后使用，重新冻干可能会有少量损失，另外不建议反复溶冻。
2. 如多肽吸潮并出现粘璧情况，用于实验时，请直接在小管内溶解，并再次使用纯水或与实验兼容的溶剂清洁小管，以免浪费。
对于容易聚集的多肽：
通常序列中含有C，可选择6mmol的胍盐酸或6mmol的尿素来溶解，然后稀释到所需要的浓度。
对于碱性多肽：
R+H+K残基数>E+D残基数，如果纯水无法溶解，请尝试10%-30%的醋酸；如果多肽还是不溶，测试纯醋酸和三氟乙酸TFA（<50μ）来溶解，然后将多肽溶液稀释到理想浓度。
对于酸性多肽：
R+H+K残基数<E+D残基数，如果纯水无法溶解，请尝试13%氨水（V/V）或者0.1mmol NH4HCO3溶液来溶解，并稀释至所需浓度。如果多肽序列中包含半胱氨酸C，不建议用氨水溶解，可使用二甲基甲酰胺（DMF）或N-甲基吡咯烷酮（NMP）进行溶解。
对于疏水性多肽：
疏水性氨基酸残基数>50%(V L M F Y A等氨基酸因芳烃侧链而高度疏水），即使序列中含有亲水性氨基酸，多肽也可能不溶或只有少量溶于水，可以通过以下方法来增加多肽的溶解性：
1.超声助溶（注意：长时间超声处理会引起溶液发热和多肽降解）
2.调整溶液温度（<30℃)助溶
3.添加助溶剂（如DMSO、DMF、醋酸、乙腈、甲醇、丙醇或异丙醇等，请注意选择的溶剂应与实验系统相兼容），建议先将多肽溶解为高浓度溶液，再缓慢加入水或其他缓冲溶液。含有甲硫氨酸或半胱氨酸的多肽不建议用DMSO溶解，因为DMSO可能造成侧链氧化。
特别提出：
如果多肽是应用于细胞相关实验，DMSO可增加细胞的通透性并对细胞产生毒性作用，因此高浓度的DMSO溶液中，然后再用水溶液或者缓冲液如PBS慢慢（一滴一滴地）稀释至理想浓度，同时超声助溶。如果滴加过程中，肽溶液开始变浑浊，说明已经到了溶解极限。对于DMSO的使用浓度，建议如下：
A. 对几乎所有的细胞来说，浓度为0.1%DMSO是安合的。
B. 用原代细胞做剂量反应曲线（可行性），其浓度应低于0.1%
C. 广泛被用于细胞培养的DMSO终浓度为0.5%不会引起细胞毒性。
D. 虽然对部分细胞来说，1%DMSO也不会产生细胞毒性，但我们推荐0.5%，也有5%DMSO成功地应用于某些细胞的案例。
强耀生物科技有限公司 17362986275 QQ：288052672
对于使用多肽的研究人员来说，多肽的溶解是一个主要的难题。每个氨基酸都有其固有化学特性，因此不同的多肽因其氨基酸组成不同、排列顺序不同而具有不同的溶解性。氨基酸按照其亲、疏水性可分为：
亲水性氨基酸：D E H K Q R S T N 羟脯氨酸
疏水性氨基酸：A F I L M P V W Y α-氨基丁酸 β-氨基丙氨酸 正亮氨酸
未定类：GC
在多肽溶解之前请先取小部分进行多肽溶解测试，您可能需要测试几种不同的溶剂，直到找到最适当的一种。
对于亲水性较好的多肽：
１. 短肽和较短的多肽，往往具有较强的亲水性，尤其是二肽或三肽，一般纯水就可以很好的溶解。
２. 亲水性氨基酸平均分配于全部序列，并且序列中含有＞25%的带电氨基酸（EDRHK)和＜25%的疏水性氨基酸，可以用无菌的蒸馏水、去离子水或缓冲溶液溶解（如果条件允许则用无氧水）。
温馨小提示：对于亲水性特别强的序列，可能存在吸潮现象，对此请参考下列方法：
1. 如有冻干条件，请用纯水溶解，重新冻干后使用，重新冻干可能会有少量损失，另外不建议反复溶冻。
2. 如多肽吸潮并出现粘璧情况，用于实验时，请直接在小管内溶解，并再次使用纯水或与实验兼容的溶剂清洁小管，以免浪费。
对于容易聚集的多肽：
通常序列中含有C，可选择6mmol的胍盐酸或6mmol的尿素来溶解，然后稀释到所需要的浓度。
对于碱性多肽：
R+H+K残基数>E+D残基数，如果纯水无法溶解，请尝试10%-30%的醋酸；如果多肽还是不溶，测试纯醋酸和三氟乙酸TFA（<50μ）来溶解，然后将多肽溶液稀释到理想浓度。
对于酸性多肽：
R+H+K残基数<E+D残基数，如果纯水无法溶解，请尝试13%氨水（V/V）或者0.1mmol NH4HCO3溶液来溶解，并稀释至所需浓度。如果多肽序列中包含半胱氨酸C，不建议用氨水溶解，可使用二甲基甲酰胺（DMF）或N-甲基吡咯烷酮（NMP）进行溶解。
对于疏水性多肽：
疏水性氨基酸残基数>50%(V L M F Y A等氨基酸因芳烃侧链而高度疏水），即使序列中含有亲水性氨基酸，多肽也可能不溶或只有少量溶于水，可以通过以下方法来增加多肽的溶解性：
1.超声助溶（注意：长时间超声处理会引起溶液发热和多肽降解）
2.调整溶液温度（<30℃)助溶
3.添加助溶剂（如DMSO、DMF、醋酸、乙腈、甲醇、丙醇或异丙醇等，请注意选择的溶剂应与实验系统相兼容），建议先将多肽溶解为高浓度溶液，再缓慢加入水或其他缓冲溶液。含有甲硫氨酸或半胱氨酸的多肽不建议用DMSO溶解，因为DMSO可能造成侧链氧化。
特别提出：
如果多肽是应用于细胞相关实验，DMSO可增加细胞的通透性并对细胞产生毒性作用，因此高浓度的DMSO溶液中，然后再用水溶液或者缓冲液如PBS慢慢（一滴一滴地）稀释至理想浓度，同时超声助溶。如果滴加过程中，肽溶液开始变浑浊，说明已经到了溶解极限。对于DMSO的使用浓度，建议如下：
A. 对几乎所有的细胞来说，浓度为0.1%DMSO是安合的。
B. 用原代细胞做剂量反应曲线（可行性），其浓度应低于0.1%
C. 广泛被用于细胞培养的DMSO终浓度为0.5%不会引起细胞毒性。
D. 虽然对部分细胞来说，1%DMSO也不会产生细胞毒性，但我们推荐0.5%，也有5%DMSO成功地应用于某些细胞的案例。
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