接种医生 1、辉瑞-BioNTech疫苗剂型与用量
辉瑞-BioNTech 的COVID-19疫苗以冷冻悬液的形式提供，不含防腐剂，在零下60 到零下 80 摄氏度保存。在使用前，每个小瓶必须用 1.8 毫升的无菌 0.9％ 氯化钠注射液将疫苗稀释。稀释后，可以储存在摄氏 2 到 25 度之间，必须在六小时内用完。
接种途径是肌肉注射，一瓶可注射五次，每剂 0.3 毫升。每剂含有30ug mRNA，前后要打两剂，两剂间隔 21 天。2、mRNA疫苗其他组分
mRNA 疫苗最为独特的技术，是将 mRNA 包在脂质纳米颗粒 - 微小脂肪气泡中。脂质纳米颗粒不仅能够保护 mRNA 分子，而且还会通过脂质膜融合，将 mRNA 传递进肌肉组织细胞内。所以，脂质纳米颗粒虽然不是活性成分，却是这种新型疫苗关键的组成部分。
脂质纳米颗粒，包裹mRNA疫苗
辉瑞-BioNTech 的 COVID-19 疫苗每剂包含以下脂质成分：0.43 毫克（4-羟丁基）氮杂二基）双（己烷-6,1-二基）双（2-己基癸酸酯），0.05 毫克 2 [（聚乙二醇）- 2000] - N，N-二十四烷基乙酰胺，0.09 毫克 1,2 - 二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱， 0.2 毫克胆固醇，0.01 毫克氯化钾，0.01 毫克磷酸钾，0.36 毫克氯化钠，0.0 7 毫克二水磷酸氢二钠，和 6 毫克蔗糖。
此外，稀释剂（0.9％氯化钠注射液）给每剂增加了 2.16 毫克的氯化钠。
3、辉瑞-BioNTech疫苗安全性
注射后二月观察，没有发现重大安全问题。
常见副作用或不良反应：注射部位反应（84.1%），乏力(14.2%)，头痛(55.1%)，肌肉酸痛(38.3%)，畏寒(31.9%)，关节痛(23.6%)，发热(14.2%)；从四月到十一月，共六例死亡，二例死亡是在疫苗接种组，四例死亡在安慰剂组。都与疫苗无关。
严重不良反应0-4.6%，第二剂更常见；通常年龄越大，不良反应（《2.8%反而比年轻人要轻（〈4.6%）疫苗组面瘫4例，安慰剂组没有，但不高于正常人群。
4、新冠疫苗价格
阿斯利康的腺病毒疫苗每剂4美元，Moderna的mRNA疫苗约为25-37美元每剂，BioNTech的mRNA疫苗价格约为19美元每剂，中国科兴(Sinovac)的灭活疫苗价格约为10.65-21美元每剂。
其中的价格波动有各国补贴影响，更多的是冷链运输成本不一，如辉瑞-BioNTech疫苗需要-70度（干冰）运输，其在英国接种时，冷链成本占80%。
5、mRNA疫苗简介
mRNA疫苗属于第三代疫苗技术，相比于传统疫苗需要通过将病原微生物及其代谢产物通过人工灭毒﹑减活﹑基因工程的方法制成，第三代疫苗特异性更强，有效性更高，并且研发周期较快，扩大产能很容易。它的结构简单、可人工批量合成，并且可以在研发阶段进行高通量筛选，大大节省研发时间。而且相较于DNA疫苗，mRNA疫苗没有导入外源基因的遗传风险，起效更快，效果更强。
mRNA疫苗的优势
6、mRNA疫苗结构及关键点
mRNA疫苗结构，5'-帽子、5'-UTR、表达蛋白的CDS区、3'-UTR、poly(A)尾组成
7-甲基鸟苷帽子(m7GPPPN)结合在5’ 端(5’-Cap)；poly(A)尾结合在3’ 端; 蛋白质编码区(CDS)开放阅读框(ORF)由起始密码子和终止密码子标记; 未翻译区(UTR)位于cap/tail和CDS之间。mRNA在转录过程中或转录后，在酶作用下加上5’-cap。5’-Cap在mRNA中起着至关重要的作用：mRNA的成熟、剪接、翻译都与其相关。
3‘末端的poly(A)尾对mRNA的稳定性和随后的翻译过程很重要。
5’及3’-UTR包含了α、β-球蛋白序列，可以增强mRNA的稳定性和翻译效率。3’-和5’-UTR都可抑制mRNA的decapping和降解。
对mRNA本身来讲，主要关注点是如何增加mRNA的稳定性延长半衰期、提高翻译效率和降低免疫原性，与之有关的关键技术主要包括：
（1）合成的帽子结构能够稳定mRNA，并通过结合于真核翻译起始因子4E（EIF4E）提高蛋白的翻译效率
（2）位于5’-UTR和3’-UTR非翻译区的调控原件能够稳定mRNA并提高蛋白翻译效率
（3）多聚A尾能够稳定mRNA并提高蛋白翻译效率
（4）修饰的核苷酸能够降低天然免疫反应并提高翻译效率
（5）分离/纯化技术：RNase处理和液相色谱纯化技术(去除dsRNA、蛋白等杂质)降低免疫原性，并提高翻译效率
（6）序列和/或密码子优化技术提高翻译效率
8、mRNA疫苗的其他应用
mRNA疫苗除了应用在传染病预防上，它另一个重要用途是治疗肿瘤。11月11日，Moderna宣布，其开发的个体化肿瘤疫苗mRNA-4157在早期临床实验中获得积极结果。而BioNtech在今年年初收购了开发肿瘤疫苗的明星企业Neon Therapeutics，目前研发管线中也有多款肿瘤疫苗。全球mRNA疫苗研发管线中有12种目标是传染病，4种针对罕见病，21种针对肿瘤。
龙头企业mRNA疫苗管线
9、mRNA疫苗加帽
有效的mRNA疫苗应该具有很强的稳定性，并且能够在低剂量下刺激机体产生足够强的免疫反应，以产生足够高的中和抗体滴度。增强mRNA的稳定性并提升翻译效率，最有效的解决方案是：使用加帽酶对mRNA进行加帽，使其在细胞内外稳定，并且使mRNA可以被核糖体识别，启动翻译程序。即在mRNA的5’端添加一个甲基化的鸟苷酸帽子（m7GPPPN结构），从而保护mRNA免遭核酸外切酶的攻击以增加mRNA的稳定性，协助mRNA与核糖体的结合以促进翻译起始。
mRNA疫苗"化蝶"的关键——两个加帽酶、一个加尾酶
"两个加帽酶"——稳定mRNA的存在、提高mRNA表达效率。
1、牛痘病毒加帽酶在mRNA的5’端加上一个甲基化的鸟苷酸帽子（m7GPPPN结构），形成Cap0帽子；
2、mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase在 RNA 5´末端紧邻帽结构的第一个核苷酸的 2´-O 上添加甲基基团，形成Cap1帽子（mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase仅作用于带有Cap0的mRNA）。
帽子结构能够稳定mRNA，协助核糖体识别mRNA，启动翻译，并进一步降低mRNA免疫原性、增强mRNA的表达。
mRNA的Cap0、Cap1、Cap2三种帽子结构
“加尾酶”——稳定mRNA的存在、终止转录、促进mRNA的运输和翻译。PolyA Polymerase能够在转录产物mRNA的3’端添加一个Poly A尾巴，约20-200个A碱基。Poly A尾巴的引入：一方面Poly A与相应的蛋白结合，保护mRNA免遭核酸外切酶的攻击，稳定mRNA的存在形式；另一方面延伸复合物（EC）通过poly A位点（PAS）会引起延伸因子的解离或终止因子的结合，导致复合物构象变化造成转录终止。另外，Poly A也会影响mRNA的运输和翻译。
PolyA的聚合反应 PolyA与转录终止
mRNA体外合成解决方案
近岸蛋白质提供mRNA疫苗体外合成完整解决方案，全部GMP级产品，主要包括：T7RNA聚合酶、牛痘病毒加帽酶、2-甲基转移酶、RNase抑制剂、DNase I、无机焦磷酸酶以及加尾酶。
扩展阅读
Moderna94.5%的有效率是怎样得出的？
和辉瑞/BioNTech疫苗一样，Moderna设定的目标有效率也是60%，高于美国FDA对于新冠疫苗要获得紧急使用许可的最低有效标准——50%。
而这两个最早初步公布三期临床试验数据的疫苗，保护效率都远远超过了目标值，达到了90%以上，给了全球极大的抗疫信心。
根据Moderna的公告，新冠疫苗的三期临床试验共入组了30000人，均为18岁以上的成年人，随机双盲1:1分成两组，也就是疫苗组和安慰剂对照组各有15000人。
自7月底开始三期临床试验，截至10月22日，Moderna完成了所有入组者的登记。
此次发布的第一个中期分析结果中，已经出现了95个在接种第二剂疫苗两周后感染病毒的确诊病例，包括15名老年人（65岁以上）和20名少数族裔受试者。
这95个确诊病例中，90人来自安慰剂对照组，5人来自疫苗组。因此能计算得出，接种疫苗降低了（90-5）/90=94.5%的感染比例，也就是疫苗的有效率为94.5%。这意味着，接种了疫苗的人相比没接种的，能降低94.5%的感染风险。
当然，以上还只是Moderna三期临床的第一次中期分析，并不是最终结果。
安全性是疫苗另一重要指标
中期分析显示疫苗接种没有严重的安全隐患。受试者对该疫苗耐受性良好，大多数不良事件为轻度或中度。首次接种后超过2％的3级不良事件包括注射部位疼痛（2.7％）；第二次接种后包括疲劳（9.7％），肌痛（8.9％），关节痛（5.2％） ，头痛（4.5％），疼痛（4.1％）和注射部位红斑（2.0％）。这些不良事件持续时间短暂。
mRNA疫苗研究、mRNA介导的CAR-T疗法系列产品
辉瑞-BioNTech 的COVID-19疫苗以冷冻悬液的形式提供，不含防腐剂，在零下60 到零下 80 摄氏度保存。在使用前，每个小瓶必须用 1.8 毫升的无菌 0.9％ 氯化钠注射液将疫苗稀释。稀释后，可以储存在摄氏 2 到 25 度之间，必须在六小时内用完。
接种途径是肌肉注射，一瓶可注射五次，每剂 0.3 毫升。每剂含有30ug mRNA，前后要打两剂，两剂间隔 21 天。2、mRNA疫苗其他组分
mRNA 疫苗最为独特的技术，是将 mRNA 包在脂质纳米颗粒 - 微小脂肪气泡中。脂质纳米颗粒不仅能够保护 mRNA 分子，而且还会通过脂质膜融合，将 mRNA 传递进肌肉组织细胞内。所以，脂质纳米颗粒虽然不是活性成分，却是这种新型疫苗关键的组成部分。
脂质纳米颗粒，包裹mRNA疫苗
辉瑞-BioNTech 的 COVID-19 疫苗每剂包含以下脂质成分：0.43 毫克（4-羟丁基）氮杂二基）双（己烷-6,1-二基）双（2-己基癸酸酯），0.05 毫克 2 [（聚乙二醇）- 2000] - N，N-二十四烷基乙酰胺，0.09 毫克 1,2 - 二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱， 0.2 毫克胆固醇，0.01 毫克氯化钾，0.01 毫克磷酸钾，0.36 毫克氯化钠，0.0 7 毫克二水磷酸氢二钠，和 6 毫克蔗糖。
此外，稀释剂（0.9％氯化钠注射液）给每剂增加了 2.16 毫克的氯化钠。
3、辉瑞-BioNTech疫苗安全性
注射后二月观察，没有发现重大安全问题。
常见副作用或不良反应：注射部位反应（84.1%），乏力(14.2%)，头痛(55.1%)，肌肉酸痛(38.3%)，畏寒(31.9%)，关节痛(23.6%)，发热(14.2%)；从四月到十一月，共六例死亡，二例死亡是在疫苗接种组，四例死亡在安慰剂组。都与疫苗无关。
严重不良反应0-4.6%，第二剂更常见；通常年龄越大，不良反应（《2.8%反而比年轻人要轻（〈4.6%）疫苗组面瘫4例，安慰剂组没有，但不高于正常人群。
4、新冠疫苗价格
阿斯利康的腺病毒疫苗每剂4美元，Moderna的mRNA疫苗约为25-37美元每剂，BioNTech的mRNA疫苗价格约为19美元每剂，中国科兴(Sinovac)的灭活疫苗价格约为10.65-21美元每剂。
其中的价格波动有各国补贴影响，更多的是冷链运输成本不一，如辉瑞-BioNTech疫苗需要-70度（干冰）运输，其在英国接种时，冷链成本占80%。
5、mRNA疫苗简介
mRNA疫苗属于第三代疫苗技术，相比于传统疫苗需要通过将病原微生物及其代谢产物通过人工灭毒﹑减活﹑基因工程的方法制成，第三代疫苗特异性更强，有效性更高，并且研发周期较快，扩大产能很容易。它的结构简单、可人工批量合成，并且可以在研发阶段进行高通量筛选，大大节省研发时间。而且相较于DNA疫苗，mRNA疫苗没有导入外源基因的遗传风险，起效更快，效果更强。
mRNA疫苗的优势
6、mRNA疫苗结构及关键点
mRNA疫苗结构，5'-帽子、5'-UTR、表达蛋白的CDS区、3'-UTR、poly(A)尾组成
7-甲基鸟苷帽子(m7GPPPN)结合在5’ 端(5’-Cap)；poly(A)尾结合在3’ 端; 蛋白质编码区(CDS)开放阅读框(ORF)由起始密码子和终止密码子标记; 未翻译区(UTR)位于cap/tail和CDS之间。mRNA在转录过程中或转录后，在酶作用下加上5’-cap。5’-Cap在mRNA中起着至关重要的作用：mRNA的成熟、剪接、翻译都与其相关。
3‘末端的poly(A)尾对mRNA的稳定性和随后的翻译过程很重要。
5’及3’-UTR包含了α、β-球蛋白序列，可以增强mRNA的稳定性和翻译效率。3’-和5’-UTR都可抑制mRNA的decapping和降解。
对mRNA本身来讲，主要关注点是如何增加mRNA的稳定性延长半衰期、提高翻译效率和降低免疫原性，与之有关的关键技术主要包括：
（1）合成的帽子结构能够稳定mRNA，并通过结合于真核翻译起始因子4E（EIF4E）提高蛋白的翻译效率
（2）位于5’-UTR和3’-UTR非翻译区的调控原件能够稳定mRNA并提高蛋白翻译效率
（3）多聚A尾能够稳定mRNA并提高蛋白翻译效率
（4）修饰的核苷酸能够降低天然免疫反应并提高翻译效率
（5）分离/纯化技术：RNase处理和液相色谱纯化技术(去除dsRNA、蛋白等杂质)降低免疫原性，并提高翻译效率
（6）序列和/或密码子优化技术提高翻译效率
8、mRNA疫苗的其他应用
mRNA疫苗除了应用在传染病预防上，它另一个重要用途是治疗肿瘤。11月11日，Moderna宣布，其开发的个体化肿瘤疫苗mRNA-4157在早期临床实验中获得积极结果。而BioNtech在今年年初收购了开发肿瘤疫苗的明星企业Neon Therapeutics，目前研发管线中也有多款肿瘤疫苗。全球mRNA疫苗研发管线中有12种目标是传染病，4种针对罕见病，21种针对肿瘤。
龙头企业mRNA疫苗管线
9、mRNA疫苗加帽
有效的mRNA疫苗应该具有很强的稳定性，并且能够在低剂量下刺激机体产生足够强的免疫反应，以产生足够高的中和抗体滴度。增强mRNA的稳定性并提升翻译效率，最有效的解决方案是：使用加帽酶对mRNA进行加帽，使其在细胞内外稳定，并且使mRNA可以被核糖体识别，启动翻译程序。即在mRNA的5’端添加一个甲基化的鸟苷酸帽子（m7GPPPN结构），从而保护mRNA免遭核酸外切酶的攻击以增加mRNA的稳定性，协助mRNA与核糖体的结合以促进翻译起始。
mRNA疫苗"化蝶"的关键——两个加帽酶、一个加尾酶
"两个加帽酶"——稳定mRNA的存在、提高mRNA表达效率。
1、牛痘病毒加帽酶在mRNA的5’端加上一个甲基化的鸟苷酸帽子（m7GPPPN结构），形成Cap0帽子；
2、mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase在 RNA 5´末端紧邻帽结构的第一个核苷酸的 2´-O 上添加甲基基团，形成Cap1帽子（mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase仅作用于带有Cap0的mRNA）。
帽子结构能够稳定mRNA，协助核糖体识别mRNA，启动翻译，并进一步降低mRNA免疫原性、增强mRNA的表达。
mRNA的Cap0、Cap1、Cap2三种帽子结构
“加尾酶”——稳定mRNA的存在、终止转录、促进mRNA的运输和翻译。PolyA Polymerase能够在转录产物mRNA的3’端添加一个Poly A尾巴，约20-200个A碱基。Poly A尾巴的引入：一方面Poly A与相应的蛋白结合，保护mRNA免遭核酸外切酶的攻击，稳定mRNA的存在形式；另一方面延伸复合物（EC）通过poly A位点（PAS）会引起延伸因子的解离或终止因子的结合，导致复合物构象变化造成转录终止。另外，Poly A也会影响mRNA的运输和翻译。
PolyA的聚合反应 PolyA与转录终止
mRNA体外合成解决方案
近岸蛋白质提供mRNA疫苗体外合成完整解决方案，全部GMP级产品，主要包括：T7RNA聚合酶、牛痘病毒加帽酶、2-甲基转移酶、RNase抑制剂、DNase I、无机焦磷酸酶以及加尾酶。
扩展阅读
Moderna94.5%的有效率是怎样得出的？
和辉瑞/BioNTech疫苗一样，Moderna设定的目标有效率也是60%，高于美国FDA对于新冠疫苗要获得紧急使用许可的最低有效标准——50%。
而这两个最早初步公布三期临床试验数据的疫苗，保护效率都远远超过了目标值，达到了90%以上，给了全球极大的抗疫信心。
根据Moderna的公告，新冠疫苗的三期临床试验共入组了30000人，均为18岁以上的成年人，随机双盲1:1分成两组，也就是疫苗组和安慰剂对照组各有15000人。
自7月底开始三期临床试验，截至10月22日，Moderna完成了所有入组者的登记。
此次发布的第一个中期分析结果中，已经出现了95个在接种第二剂疫苗两周后感染病毒的确诊病例，包括15名老年人（65岁以上）和20名少数族裔受试者。
这95个确诊病例中，90人来自安慰剂对照组，5人来自疫苗组。因此能计算得出，接种疫苗降低了（90-5）/90=94.5%的感染比例，也就是疫苗的有效率为94.5%。这意味着，接种了疫苗的人相比没接种的，能降低94.5%的感染风险。
当然，以上还只是Moderna三期临床的第一次中期分析，并不是最终结果。
安全性是疫苗另一重要指标
中期分析显示疫苗接种没有严重的安全隐患。受试者对该疫苗耐受性良好，大多数不良事件为轻度或中度。首次接种后超过2％的3级不良事件包括注射部位疼痛（2.7％）；第二次接种后包括疲劳（9.7％），肌痛（8.9％），关节痛（5.2％） ，头痛（4.5％），疼痛（4.1％）和注射部位红斑（2.0％）。这些不良事件持续时间短暂。
mRNA疫苗研究、mRNA介导的CAR-T疗法系列产品
