提起细胞培养中牛血清的融化,大家首先想到的就是4℃过夜法。今天小威把国际上流行多年的『血清融化三步法』介绍给大家,让你知道怎样让你的血清,通过合适的融化,事半功倍!
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与4℃过夜法相比, 三步法为什么对血清更好呢?重点有二!
其一:
记得吗?血清在融化过程中,瓶子里冰块的底部你会看见亮亮的蛋白丝在下沉,如同蜂蜜溶于水时的亮线,这就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔点高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。试想,如果采用4℃过夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大约需要10小时左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此时就很容易有一些蛋白饱和析出,(大多是脂蛋白和纤连蛋白),这就是血清融化中产生沉淀的重要原因之一。
采用三步法,只要2.5个小时,温和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化过程中可以间断轻轻摇摆瓶子,让蛋白在瓶中混匀。此方法不但节约了时间,而且最大限度减少了血清沉淀出现的几率。
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血清融化过程中,蛋白质会比水先融化。冰块底部亮亮的细丝就是融化中的蛋白
其二:血清在培养细胞中,最重要的是利用它的活性的因子,因此,融化过程中最大限度地保留因子的活性,就变得非常重要。回忆一下,细胞复苏时,要保持细胞的活性,我们是要遵循“快融”原则还是“慢融”原则呢?快融!血清同样如此!三步法需要两个半小时,4℃过夜需要大约10个小时(冰箱一般设2-8℃,所以各实验室融化时间会稍有出入)。哪个速度对保留活性更好?不言而喻!
注意
1.在水浴过程中,血清的平面要完全浸在水中。在融化过程中要慢慢摇动,使血清混匀,但不要产生泡沫!
2.胎牛血清不推荐热灭活。
3.此三步法适用于所有品牌、所有级别的进口或国产血清,均可让血清在减少沉淀、保留活性、提高细胞培养效果方面,得到不同程度的提高!
看到这里,你是不是迫不及待的想试试融化血清的三步法了呢?其实,想快速得到高品质的血清,除了科学的融化方法,自身品质出众的血清,完备的运输冷链,贴心的售后服务,这些都是不可或缺的!
说明:此血清融化三步法由Ausbian牛血清代理商威正翔禹/缔一生物,根据国外经验总结,特别贡献~!
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与4℃过夜法相比, 三步法为什么对血清更好呢?重点有二!
其一:
记得吗?血清在融化过程中,瓶子里冰块的底部你会看见亮亮的蛋白丝在下沉,如同蜂蜜溶于水时的亮线,这就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔点高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。试想,如果采用4℃过夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大约需要10小时左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此时就很容易有一些蛋白饱和析出,(大多是脂蛋白和纤连蛋白),这就是血清融化中产生沉淀的重要原因之一。
采用三步法,只要2.5个小时,温和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化过程中可以间断轻轻摇摆瓶子,让蛋白在瓶中混匀。此方法不但节约了时间,而且最大限度减少了血清沉淀出现的几率。
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血清融化过程中,蛋白质会比水先融化。冰块底部亮亮的细丝就是融化中的蛋白
其二:血清在培养细胞中,最重要的是利用它的活性的因子,因此,融化过程中最大限度地保留因子的活性,就变得非常重要。回忆一下,细胞复苏时,要保持细胞的活性,我们是要遵循“快融”原则还是“慢融”原则呢?快融!血清同样如此!三步法需要两个半小时,4℃过夜需要大约10个小时(冰箱一般设2-8℃,所以各实验室融化时间会稍有出入)。哪个速度对保留活性更好?不言而喻!
注意
1.在水浴过程中,血清的平面要完全浸在水中。在融化过程中要慢慢摇动,使血清混匀,但不要产生泡沫!
2.胎牛血清不推荐热灭活。
3.此三步法适用于所有品牌、所有级别的进口或国产血清,均可让血清在减少沉淀、保留活性、提高细胞培养效果方面,得到不同程度的提高!
看到这里,你是不是迫不及待的想试试融化血清的三步法了呢?其实,想快速得到高品质的血清,除了科学的融化方法,自身品质出众的血清,完备的运输冷链,贴心的售后服务,这些都是不可或缺的!
说明:此血清融化三步法由Ausbian牛血清代理商威正翔禹/缔一生物,根据国外经验总结,特别贡献~!