操作步骤：
第一次使用前请先在15ml漂洗液中加入60ml无水乙醇， 所有离心步骤均可使用台式离心机在室温下离心。
1． 将单一的目的 DNA 条带从聚丙烯酰胺凝胶中切下 （尽量切除多余部分） ， 放入 1.5ml 离心管中， 称取重量，用研磨杵将胶尽量挤压碎。加入 2 倍体积的溶液 A 吹打混匀（每 100mg 胶加入 200ul 溶液 A） ，75℃水浴30 分钟。
2．用 1ml 的去尖吸头吸取混合物至过滤柱中（将胶一起吸入，溶液过多时可分次加入） 。13,000rpm 离心 1分钟。将收集管中的滤出液转入新离心管中。
3. 取六倍体积溶液 B 加入原离心管中（每 100mg 胶加入 600ul） ，清洗管壁后加入过滤柱中(溶液过多时可分次加入)，颠倒过滤柱或轻轻吹打几次混匀，13,000rpm 离心 1 分钟。将所有收集的滤出液混合。
4．将总滤出液混匀后加入吸附柱中（溶液过多时可分次加入） ，13,000rpm 离心 30-60 秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放入收集管中。
5．向吸附柱中加入 600μl 漂洗液（使用前请先检查是否已加入无水乙醇） ，13,000rpm 离心 30-60 秒，倒掉废液，将吸附柱重新放入收集管中。
6．向吸附柱中加入 600μl 漂洗液，13,000rpm 离心 30-60 秒，倒掉废液。
7．将离心吸附柱放回收集管中，13,000rpm 离心 2 分钟，尽量除去漂洗液。将吸附柱开盖置于室温 1-2 分钟，彻底晾干，以防止残留的漂洗液影响下一步的实验。
8．将吸附柱放到一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量 65–70℃预热的洗脱缓冲液 20-30μl，室温放置 2 分钟。13,000rpm 离心 2 分钟收集 DNA 溶液。注意：①为了增加回收效率，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，13,000rpm 再次离心 1 分钟。②洗脱缓冲液体积不应少于 20μl，体积过小影响回收效率。③洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其 pH 值在 7.0-8.5 之间。
9．DNA 回收产物直接后续实验或者-20℃保存。

注意事项：
1．电泳时最好使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。
2．切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对 DNA 造成损伤。
3．50bp DNA 片段回收效率偏低（30%左右） ，如要回收，应加大结合液的体积，延长吸附和洗脱的时间。
4. 回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越小，回收率越低。

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