中国HIV/HCV合并感染人群DAAs预存耐药突变的特点研究
原创 2017-02-18 蔡卫平 关艾汇


背景
由于传播途径类似，丙型肝炎病毒（HCV）和人类免疫缺陷病毒（HIV）合并感染的比例比较高。虽然联合抗逆转录病毒治疗（cART）能够明显改善HIV感染者的寿命及预后，但合并HCV感染导致的终末期肝病仍是病人死亡的主要原因。有效的抗HCV治疗可极大地降低HIV/HCV合并感染者终末期肝病的发生率。干扰素和利巴韦林联合用药广泛用于HCV感染的治疗，但该方案疗效有限，且具有较强副作用。HCV直接抗病毒药物（DAA）的出现，显著提高了抗HCV的疗效，有望最终完全取代干扰素疗法，但其疗效可能受到预存耐药突变的影响。
本研究旨在了解我国HIV/HCV合并感染者对NS3/4A蛋白酶抑制剂与NS5B聚合酶抑制剂的预存耐药突变位点，为DAAs进入中国后的临床用药提供依据。

方法
研究人群来自国家科技部“十一五、十二五”重大专项课题建立的HIV/HCV合并感染者队列（分布于我国东、西、南、北及中部12个省份），共826例，均未接受cART和抗HCV治疗。
采用自行设计的特异引物型别，行RT-PCR，获得病人的HCV NS3/4A序列及HCV NS5B序列，经过序列比对和进化树确定HCV的基因型和表型，分析所有基因型与NS3/4A蛋白酶抑制剂及NS5B聚合酶抑制剂相关的耐药突变点。
结果
1.一般资料：826例病人的男女比例为3.2:1， 30~50岁占84%，感染途径：静脉吸毒566例（68.5%），性途径178例（21.5%），输血58例（7%），其他24例（3%）。
2.NS3区耐药突变点、NS3/4A蛋白酶抑制剂耐药突变点与表型耐药：826例病人中，778例成功扩增出NS3/4A区，基因1型 193例，2型 23例，3型 237例，和6型 325例。72.8%(566/778)的HCV NS3/4A序列发现一个以上的对NS3/4A蛋白酶抑制剂预存耐药的突变位点，基因1型的检出率为3.6%(7/193)，基因2型、3型均为100%(23/23；237/237)，基因6型中高达92%(299/325)。Q80K变异主要发生在HCV 6a中，检出率98.4% (320/325)，但Q80K极少引起高度耐药（0.8%）。
3.NS5B区耐药突变点、NS5B蛋白酶抑制剂耐药突变点与表型耐药：826例病人中，350例成功扩增出NS5B序列，基因1a型10例，1b型69例，2a型4例，3a型39例，3b型25例，6a型201例，6n型2例。共检测出72个（20.6％）变异位点，主要包括：C316N 70例（20％），其中64例1b型，1例3a 型，5例6a型； 316W 1例（0.03％）；V321F 1例（0.03％）；未检出任何次要变异位点。基因1b型中，C316N突变检出率高达93%(64/69)，该突变可引起对NS5B聚合酶抑制剂低度耐药。

结论
我国HIV/HCV合并感染者对DAAs存在预存耐药突变位点，变异率因HCV基因型而异，不同基因型可预存不同耐药，提示使用DAAs前应常规检测基因型。由于该研究对可导致DAAs高度耐药的突变位点
原创 2017-02-18 蔡卫平 关艾汇


背景
由于传播途径类似，丙型肝炎病毒（HCV）和人类免疫缺陷病毒（HIV）合并感染的比例比较高。虽然联合抗逆转录病毒治疗（cART）能够明显改善HIV感染者的寿命及预后，但合并HCV感染导致的终末期肝病仍是病人死亡的主要原因。有效的抗HCV治疗可极大地降低HIV/HCV合并感染者终末期肝病的发生率。干扰素和利巴韦林联合用药广泛用于HCV感染的治疗，但该方案疗效有限，且具有较强副作用。HCV直接抗病毒药物（DAA）的出现，显著提高了抗HCV的疗效，有望最终完全取代干扰素疗法，但其疗效可能受到预存耐药突变的影响。
本研究旨在了解我国HIV/HCV合并感染者对NS3/4A蛋白酶抑制剂与NS5B聚合酶抑制剂的预存耐药突变位点，为DAAs进入中国后的临床用药提供依据。

方法
研究人群来自国家科技部“十一五、十二五”重大专项课题建立的HIV/HCV合并感染者队列（分布于我国东、西、南、北及中部12个省份），共826例，均未接受cART和抗HCV治疗。
采用自行设计的特异引物型别，行RT-PCR，获得病人的HCV NS3/4A序列及HCV NS5B序列，经过序列比对和进化树确定HCV的基因型和表型，分析所有基因型与NS3/4A蛋白酶抑制剂及NS5B聚合酶抑制剂相关的耐药突变点。
结果
1.一般资料：826例病人的男女比例为3.2:1， 30~50岁占84%，感染途径：静脉吸毒566例（68.5%），性途径178例（21.5%），输血58例（7%），其他24例（3%）。
2.NS3区耐药突变点、NS3/4A蛋白酶抑制剂耐药突变点与表型耐药：826例病人中，778例成功扩增出NS3/4A区，基因1型 193例，2型 23例，3型 237例，和6型 325例。72.8%(566/778)的HCV NS3/4A序列发现一个以上的对NS3/4A蛋白酶抑制剂预存耐药的突变位点，基因1型的检出率为3.6%(7/193)，基因2型、3型均为100%(23/23；237/237)，基因6型中高达92%(299/325)。Q80K变异主要发生在HCV 6a中，检出率98.4% (320/325)，但Q80K极少引起高度耐药（0.8%）。
3.NS5B区耐药突变点、NS5B蛋白酶抑制剂耐药突变点与表型耐药：826例病人中，350例成功扩增出NS5B序列，基因1a型10例，1b型69例，2a型4例，3a型39例，3b型25例，6a型201例，6n型2例。共检测出72个（20.6％）变异位点，主要包括：C316N 70例（20％），其中64例1b型，1例3a 型，5例6a型； 316W 1例（0.03％）；V321F 1例（0.03％）；未检出任何次要变异位点。基因1b型中，C316N突变检出率高达93%(64/69)，该突变可引起对NS5B聚合酶抑制剂低度耐药。

结论
我国HIV/HCV合并感染者对DAAs存在预存耐药突变位点，变异率因HCV基因型而异，不同基因型可预存不同耐药，提示使用DAAs前应常规检测基因型。由于该研究对可导致DAAs高度耐药的突变位点
