PBS缓冲液是实验室中常用的缓冲液之一,不管是免疫组化实验还是细胞培养实验,都经常会用到PBS缓冲液。以下是我整理的一些PBS缓冲液的配置方法。
PBS缓冲液的配制:
方法一:
含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:
1.称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水;
2.PBS:Phosphate Buffered Saline;
3.PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g;
4.磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g;
5.氯化钠(NaCl):8g;
6.氯化钾(KCl)0.2g;
7.加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L;
方法二:
母液的配制:
0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4:称取 2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水
各种浓度
PB(pH=7.4)的配制:
先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如: 0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。如:
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
方法三:用于细胞培养的PBS需含有氯化钾
称取8g NaC1、0.2g KCI、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCI调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M
方法四:PBS缓冲液
称取8g NaC1、0.2g KCI、1.44g Na2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :
pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)
5.7 93.5 6.5
5.8 92 8
5.9 90 10
6.0 87.7 12.3
6.1 85 15
6.2 81.5 18.5
6.3 77.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 37.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51 49
6.9 45 55
7.0 38 62
7.1 33 67
7.2 28 72
7.3 23 77
7.4 19ml 81ml
7.5 16 84
7.6 13 87
7.7 10.5 0.5
7.8 8.5 91.5
7.9 7 93
8.0 5.3 94.7
PBS缓冲液的配制:
方法一:
含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:
1.称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水;
2.PBS:Phosphate Buffered Saline;
3.PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g;
4.磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g;
5.氯化钠(NaCl):8g;
6.氯化钾(KCl)0.2g;
7.加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L;
方法二:
母液的配制:
0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4:称取 2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水
各种浓度
PB(pH=7.4)的配制:
先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如: 0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。如:
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
方法三:用于细胞培养的PBS需含有氯化钾
称取8g NaC1、0.2g KCI、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCI调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M
方法四:PBS缓冲液
称取8g NaC1、0.2g KCI、1.44g Na2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :
pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)
5.7 93.5 6.5
5.8 92 8
5.9 90 10
6.0 87.7 12.3
6.1 85 15
6.2 81.5 18.5
6.3 77.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 37.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51 49
6.9 45 55
7.0 38 62
7.1 33 67
7.2 28 72
7.3 23 77
7.4 19ml 81ml
7.5 16 84
7.6 13 87
7.7 10.5 0.5
7.8 8.5 91.5
7.9 7 93
8.0 5.3 94.7