1. 对于石蜡切片：
a. 脱蜡：二甲苯3次，每次3-5min→ 无水乙醇2次，每次3-5min→ 95％乙醇1次，3-5min→ 90%乙醇1次，3-5min→ 75％乙醇1次，3-5min→ 蒸馏水洗2次，每次3-5min。
b. 抗原修复：将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95-100℃加热约15 min (加热时间可以控制在10-20 min内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30 min内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次，每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片：
用免疫染色洗涤液洗涤切片5 min。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95-100℃加热约15 min (加热时间可以控制在10-20 min内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30 min内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次，每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
3. 对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
EDTA抗原修复液的注意事项：
抗原修复时应选择最佳温度。（温度在92℃－98℃是合适的，尤其在95℃为最好）
抗原修复液必须遵循自然降温规律，否则效果不好或达不到抗原修复的目的。
抗原修复的方法，都采用加热的方法，尤其是微波辐射加热法，该法由于产热快。液体容易挥发直至干涸。因此，应用于抗原修复的液体，一定要充足，防止切片干涸。
用于抗原修复的切片，必须附贴牢固，否则发生掉片，则前功尽弃。