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金边蚂蟥抗痛风作用研究

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中草药 Chinese Traditionaland Herbal Drugs 第45 卷 第12 期 2014 年6 月
刘喜华1,黄敏琪1,林忠文1,甄汉深2,刘安韬1,张柯媛1*
1. 广西卫生职业技术学院,广西 南宁 530023
2. 广西中医药大学,广西 南宁 530001


IP属地:广西1楼2014-07-12 11:16回复
    痛风是以嘌呤代谢或排泄失常而导致血尿酸升高,进而引起结缔组织内尿酸钠结晶沉着的代谢性疾病。痛风可引起痛风性关节炎,导致生活质量的下降甚至残疾,痛风还是引起肾脏病变、糖尿病、心血管疾病、恶性肿瘤、帕金森等的危险因素[1-7]。目前临床常使用秋水仙碱、非甾体类抗炎药(NSAIDs)、肾上腺皮质激素、镇痛药等治疗痛风。这些药物虽然抗炎止痛作用快,但在抗炎止痛的同时没有降尿酸作用,且大多数药物具有明显毒副作用[1-2]。因此,研制高效低毒的抗痛风药物依然是药学研究的热点。金边蚂蟥系医蛭科动物菲牛蛭Poecilobdellamanillensis Lesson 的干燥全体,为常用壮药,具有破血通经、逐瘀消瘕之功,用于治疗血瘀经闭、症瘕痞块、中风偏瘫、跌打扭伤等症[3]。现代药理学研究表明,金边蚂蟥具有较强的抗凝血、抗血栓、抗血小板聚集、调血脂等药理活性[4-5]。但未见其治疗痛风的相关报道。本研究根据广西民间使用金边蚂蟥防治痛风的临床经验,利用次黄嘌呤复制小鼠高尿酸血症模型,大鼠足跖注射微晶型尿酸钠结晶(MSU)复制痛风性炎症模型,热板法、扭体法观察金边蚂蟥的镇痛作用,并测定金边蚂蟥对小鼠的急性毒性,为其抗痛风临床应用提供依据。


    IP属地:广西2楼2014-07-12 11:16
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      1 材料
      1.1 动物
      昆明种小鼠,清洁级;Wistar 大鼠,清洁级,均由广西医科大学实验动物中心提供,动物合格证号SCXK 桂2009-0003。
      1.2 药物及试剂
      金边蚂蟥冻干粉(本品每1 克含抗凝血酶活性480.0 U),由南宁市德营生物有限公司提供;次黄嘌呤、尿酸,Sigma 公司;别嘌醇片(批号319002),重庆科瑞制药有限责任公司;秋水仙碱片(批号121005),西双版纳药业有限责任公司;罗通定片(批号A090702),山西云鹏制药有限公司生产。
      1.3 仪器
      722 型分光光度计,上海第三分析仪器厂。
      2 方法
      2.1 金边蚂蟥对小鼠的急性毒性[6]
      选取健康成年小鼠40 只(体质量18~22 g),观察3 d 后,随机分为对照组(给予等体积的蒸馏水)和金边蚂蟥组,每组20 只,雌雄各半。金边蚂蟥组小鼠ig 给予最大浓度(生药0.577 g/kg)、最大体积(40mL/kg)金边蚂蟥(冻干粉用蒸馏水研磨成混悬液),观察14 d。观察小鼠的饮食情况、体质量、毒性症状(包括外观行为、分泌物、排泌物等)和死亡情况,14 d 后处死小鼠,解剖小鼠观察主要器官的状态。
      2.2 金边蚂蟥对尿酸水平的影响[6]
      2.2.1 对高尿酸血症小鼠尿酸的影响 选取体质量18~22 g 昆明种小鼠60 只,雌雄各半,随机分为6 组,每组10 只,即对照组,模型组,阳性药别嘌醇(25 mg/kg)组,金边蚂蟥高、中、低剂量(生药3.00、1.50、0.75 g/kg)组。各组ig 给药,每天1 次,对照组和模型组ig 给予等体积蒸馏水,连续12 d。除对照组外,各组末次给药1 h 后ip 次黄嘌呤10 mg/kg,1 h 后眼球取血,3 000 r/min 离心10min,取上清液测定血清尿酸水平(磷钨酸比色法)。
      2.2.2 对正常小鼠尿酸的影响 选取体质量18~
      22 g 昆明种小鼠40 只,雌雄各半,随机分为4 组,每组10 只,即对照组,金边蚂蟥高、中、低剂量(生药3.00、1.50、0.75 g/kg)组。各组ig 给药,每天1 次,对照组ig 给予等体积蒸馏水,连续12 d。末次给药1 h 后眼球取血,3 000 r/min 离心10 min,取上清液测定血清尿酸水平。
      2.3 金边蚂蟥对MSU 致大鼠足跖肿胀的影响[6]
      2.3.1 MSU 的制备 将5 g 尿酸置1 000 mL 沸水中,用NaOH 调pH 值至7.4,加热至95 ℃。放室温条件冷却并轻轻搅拌,滤过即得MSU,将MSU置于200 ℃高温灭菌,临用时用无菌生理盐水配成含100 mg/mL MSU的混悬液备用。
      2.3.2 分组、造模与给药 选取体质量180~220 g
      Wistar 雄性大鼠50 只,随机分为5 组,每组10 只,即对照组,模型组,阳性药秋水仙碱(1 mg/kg)组,金边蚂蟥高、低剂量(生药3.00、0.75 g/kg)组。各组ig 给药,每天1 次,对照组和模型组ig 给予等体积蒸馏水,连续15 d。除对照组外,各组末次给药1 h 后,于大鼠右后足跖sc 0.15 mL MSU(100mg/mL)致炎,分别于致炎前后测定右后足跖周长。观察和测定注射后1~7 h 不同时刻大鼠右后足跖肿胀情况及其周长,计算肿胀度。足跖肿胀度= (致炎后足跖周长-致炎前足跖周长) /致炎前足跖周长
      2.4 金边蚂蟥的镇痛作用[6]
      2.4.1 对小鼠热板痛阈的影响 将50 只预先经筛选的雌性小鼠(剔除痛阈值<5 s 或痛阈值>30 s的小鼠),随机分成5 组,即对照组,阳性对照组(罗通定,0.06 g/kg),金边蚂蟥高、中、低剂量(生药3.00、1.50、0.75 g/kg)组。各组ig 给药1 次,对照组给予等体积生理盐水。各组于给药后60 min采用热板法检测痛阈值。
      2.4.2 对醋酸引起小鼠扭体反应的影响 取昆明种小鼠50 只,雌雄各半,随机分为5 组,每组10只。分组、给药方法同“2.4.1”项。给药后1 h,每只小鼠ip 0.6%醋酸溶液0.2 mL,5 min 后计数各小鼠10 min 内出现的扭体反应次数。
      2.5 统计学方法
      采用SPSS 11.0 软件处理,计量资料用x±s表示,组间比较采用单因素方差分析。
      3 结果
      3.1 急性毒性结果
      小鼠给药后10 min,对照组和金边蚂蟥组小鼠均未出现异常。14 d 内,所有小鼠无死亡发生,饮食、外观、行为、分泌物、排泌物均无异常,对小鼠体质量的正常增长无显著影响,给予金边蚂蟥14d 后,处死小鼠,解剖观察主要脏器的情况,与对照组比较,金边蚂蟥组小鼠心、肝、肺等主要脏器体积、颜色、质地均无异常。金边蚂蟥的小鼠最大耐受量为生药23.09 g/kg,相当于临床用量的138.54倍,金边蚂蟥在一定剂量范围内应用是安全的。
      3.2 金边蚂蟥对尿酸水平的影响
      3.2.1 对高尿酸血症小鼠尿酸的影响 与对照组比较,模型组小鼠血清尿酸水平明显升高(P<0.01),提示造模成功。与模型组比较,金边蚂蟥生药1.50 g/kg 组能显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平(P<0.01)。
      3.2.2 对正常小鼠尿酸的影响 与对照组比较,金边蚂蟥3.00、1.50 g/kg 剂量组均能显著降低正常小鼠血清尿酸水平(P<0.01)。
      3.3 金边蚂蟥对MSU 致大鼠足跖肿胀的影响
      结果表明,与对照组比较,致炎2 h 后各时间点模型组大鼠足跖肿胀度明显升高(P<0.01),提示造模成功。与模型组比较,金边蚂蟥0.75 g/kg 剂量组能显著抑制致炎2 h 后不同时间点大鼠足跖肿胀度(P<0.05、0.01)
      3.4 金边蚂蟥镇痛作用
      3.4.1 对小鼠热板痛阈的影响 与对照组比较,金边蚂蟥各剂量组均未显著提高小鼠热板痛阈值。
      3.4.2 对醋酸引起小鼠扭体反应的影响 与对照组比较,金边蚂蟥3.00、0.75 g/kg 组均可显著减少醋酸引起小鼠扭体次数(P<0.05、0.01)。


      IP属地:广西3楼2014-07-12 11:17
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        4 讨论
        随着我国生活水平的提高,人们食物中嘌呤量明显增加,痛风的发病率急剧上升。据估计,在将来的20~30 年内,我国痛风病将成为仅次于糖尿病的代谢性疾病[7-8]。痛风的主要病理学基础为尿酸代谢障碍。当男性血尿酸浓度高于417 μmol/L,女性血尿酸浓度高于357 μmol/L 时,引起高尿酸血症。尿酸(2, 6, 8-三氧化嘌呤)是一种天然抗氧化剂,为嘌呤代谢的终产物,可清除人体血液中60%的自由基。当尿酸低于正常水平时,即低于120μmol/L 时,则与多发性硬化症、帕金森病、阿尔茨海默病和视神经炎等的发病有关[9-10]。中药抗痛风作用的研究,近年来取得一定的进展,中药的抗痛风活性以其高效低毒的特点引起人们的广泛关注[11-13]。昆虫类药物抗痛风活性,近年来也有相关的报道,拟黑多刺蚁具有良好的抗痛风作用,可显著降低次黄嘌呤引起的高尿酸血症小鼠尿酸水平,且具有抗尿酸炎症及镇痛作用,对痛风的治疗具有标本兼治趋势,其活性部位可能为不饱和脂肪酸部分[14-15]。金边蚂蟥富含多种活性成分,主要成分水蛭素是目前已知作用最强的凝血酶特异性抑制剂[16]。还有蝶啶类、糖脂类、羧酸酯类和甾体类等作为物质基础,使其显示出抗凝、抗血栓、调血脂、抗肿瘤等广泛的活性。本实验结果表明,金边蚂蟥可显著降低高尿酸血症小鼠和正常小鼠的尿酸水平,可显著抑制由MSU 致大鼠足跖肿胀,具有镇痛作用,且使用安全。提示金边蚂蟥对痛风具有良好的防治作用,是一种极具开发前景的高效低毒的抗痛风药物。


        IP属地:广西4楼2014-07-12 11:17
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          @Mephi @1元帅与士兵 @快乐的漂漂


          IP属地:广西6楼2014-07-12 11:38
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            又发了一遍啊……呵…呵……呵…………呵…………………有争议或怀疑也是正常的,毕竟,这吧里一向有很多药品广告与软文,还有骗子


            IP属地:陕西来自Android客户端7楼2014-07-12 11:40
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              @夏日倾情__Ixw


              IP属地:广西8楼2014-07-12 11:42
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                本着公平公正原则,这里有不卖产品,不提厂家,只讨论观点


                IP属地:广西9楼2014-07-12 11:59
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                  @angle_120


                  IP属地:广西10楼2014-07-12 12:07
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                    @时光剪影2008 问题多不怕,我开新楼慢慢答,楼中楼字数受限。
                    1 水蛭在急性发作期是可以代替秋水的,我们采集的案例中,80%以上的患者服用后两到三天就觉得痛感明显减轻,但也有20%的患者服用后痛感明显增加,但这两类患者一般在7天后,都会降低痛感,直到正常不会超过两周。
                    2 痛风石形成,和血液循环不畅有关,同时还有纤维蛋白原、凝血酶、血小板等在发挥作用。而水蛭素是一种特异结合凝血酶的抗凝物质,可以透入血栓内直接与凝血酶结合,从而溶解血栓。这种现象在分解痛风石中就好比把钢筋混凝土中的钢筋拆了,整体就容易打散了。如果是需要手术的病人,建议加大些服用的量,一天1000活性都不算多,三天内痛风石就会有明显变化。对做过手术的,可以外用水蛭泡酒内服水蛭来加速伤口愈合。
                    3 水蛭吞服也会有一些卫生上的问题,不过一般不会有寄生虫,因为水蛭的生存条件非常苛刻,寄生虫生长的腐败水质,或者是受污染的地方水蛭都无法生存。只是因加工方式或者泡制方式不同,细菌含量也会不同。所以服用水蛭粉顶多是细菌超标引起腹泻。
                    4 水蛭整体服用一般不会有耐药性,因为水蛭体内除了抗凝物质,还含有其他一些相对起抑制作用的成份在相辅相承,这样水蛭才能成为一个平衡的个体,而如果身体不平衡,水蛭这个物种是无法存在的。当然如果单是提纯出来的水蛭素,长期用就很容易有耐药。
                    5 西药降酸,一般指和尿酸中和,便会生成盐类。又或者如非布直接就阻断了尿酸的形成。而水蛭本身并不降酸,它最直接的作用是降血粘,只是让你的血液循环正常起来,补肝益肾,有利于肾将尿酸排出体外。我以前说过一句话:让血粘降下来,其它的事情交结身体自己来完成。
                    6 水蛭护肝益肾,这个效果肯定可以直接从各种肝肾功能化验结果的对比中看出来。连尿毒症这个号称肾坏死的都有效果,难道还不能使指标正常吗。
                    7 水蛭虽然不直接对其他身体问题直接发生作用,但水蛭使血液循环正常,身体组织可以自我修复,所以又都对其它病症都有一定效果。水蛭素的抗血小板聚集的功效,甚至能防止癌细胞转移。
                    8 水蛭效果的最直接体现就是血粘正常化,所谓正常化就是指太粘的变稀,太稀的变粘一引动。这个可以通过血流变的体验项目来对比。
                    9 痛风石一般都形成在血液循环不畅的地方,血粘高更加加速了尿酸的沉积结晶。血液循环的正常,可以带走沉积的尿酸。就好比够快的水流,河道不会於塞一样。
                    你的问题差不多就这些了吧,还有什么不明白的地方,我们再讨论


                    IP属地:广西13楼2014-09-03 14:27
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