一、污染防控措施 在执行PCR操作时，操作人员需严格遵循既定规程，以最大化减少乃至消除PCR过程中的污染风险。 01 操作区域划分： 尽管当前常规PCR操作难以实现全程单人单管的完全封闭作业，但无论条件如何，均须确保实验在三个独立区域内分阶段完成，且PCR的前处理与后处理需严格隔离： 样本制备区：专用于扩增模板的准备工作； PCR扩增区：涵盖反应体系的配制及PCR扩增过程； 产物分析区：负责凝胶电泳分析、产物成像及重组克隆的操作。

第一步，确定调节YBX1表达的潜在机制---泛素-蛋白酶体降解途径 为了进一步确定调节YBX1表达的潜在机制，泛素-蛋白酶体降解途径和自噬-溶酶体途径是细胞内蛋白质降解的两种重要途径。用MG132、3MA和CQ处理原代神经元（3MA是一种广泛使用的抑制细胞自噬的抑制剂，可抑制III类PI3K；CQ通过增加酸性内体/溶酶体的pH值来破坏溶酶体功能；MG132是一种广泛使用的泛素-蛋白酶体降解途径抑制剂。），发现MG132处理后，YBX1的表达水平升高（图2a）。表明泛素-蛋

番红固绿染色是一种常用的植物组织染色技术，通过利用染料分子对细胞内不同成分的亲和性差异，实现对特定结构的选择性着色，从而增强细胞结构的可视化效果。以下是关于番红固绿染色实验操作的一些小细节和注意事项。 一、实验原理 番红固绿染色主要基于染料分子与细胞内特定成分的相互作用。番红能够与植物细胞壁中的木质素、纤维素等多糖发生作用，形成鲜明的颜色对比；而固绿则常用于染色含有浆质的纤维素细胞组织，使细胞结构更

产品背景：HEK293 细胞，又叫人胚胎肾细胞 293，是一个衍生自人胚胎肾细胞的细胞系，在细胞生物学和生物技术中的应用频率仅次于第一个人类细胞系HeLa。HEK293 家族非常庞大，可衍生出数百种克隆细胞系，且成员的特点和应用也大不相同，例如 293T 细胞可大范围应用于瞬时转染，蛋白表达；293H/A 细 每 一 种 成 分 都 是 对 细 胞 的 尊 重 胞应用于噬菌斑或空斑实验；293E 细胞应用于重组蛋白的生产；293F 细胞应用于慢病毒的生产；293S 细胞应用于糖基

产品背景：干细胞是一类具有自我更新能⼒的多潜能细胞，在合适条件或信号的诱导下，能够产生表现型与基因型和自⼰完全相同的子细胞，也能产生已特化的细胞，同时还能分化为祖细胞，医学界称其为“万能细胞”。间充质干细胞（MSC）是成体干细胞的一种，可分化成多种细胞类型，如软骨细胞、脂肪细胞、成骨细胞和其他细胞类型，因此被用于许多类型的研究。 间充质干细胞具有以下特征：1. 来源于中胚层的成体干细胞，组织分布广。2. 为非

Western blot实验中常用的洗液TBST，其配方在各大实验室间大致相似，其中均包含了一种名为Tween-20的组分。Tween-20，一种呈现黄色或琥珀色、清澈透明的油状液体，带有独特的气味及轻微的苦味，在使用移液器吸取时，会产生一种阻滞的感觉。为何在Western blot的洗液TBST中要添加这样一种物质？Tween-20在Western blot实验中究竟扮演着怎样的角色？ 了解Tween-20 Tween-20，也可写作Tween 20，其化学名称为聚乙二醇山梨醇单月桂酸酯，通俗称为吐温-20或吐温20。这种物

一、实验原理 Western blot技术（亦称作蛋白质印迹法）是一种在科研中频繁应用的手段，用于分离并确认蛋白质的身份。该技术通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（即SDS-PAGE）技术，将样本中的各类蛋白质进行分离，随后将这些已分离的蛋白质转移至硝酸纤维素膜或PVDF膜上。此后的步骤涉及将膜与目标蛋白质的特异性抗体共同孵育。在洗涤膜的过程中，非特异性结合的抗体被去除，仅留下与目标蛋白质紧密结合的抗体，最终通过胶片显影或荧光扫描的方式来

干细胞是一类具有自我更新能⼒的多潜能细胞，在合适条件或信号的诱导下，能够产生表现型与基因型和自⼰完全相同的子细胞，也能产生已特化的细胞，同时还能分化为祖细胞，医学界称其为“万能细胞”。间充质干细胞（MSC）是成体干细胞的一种，可分化成多种细胞类型，如软骨细胞、脂肪细胞、成骨细胞和其他细胞类型，因此被用于许多类型的研究。 间充质干细胞具有以下特征：1. 来源于中胚层的成体干细胞，组织分布广。2. 为非造血成体干

基础细胞培养基也叫做经典培养基，包含细胞生长所需要的各种氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐离子等营养物质，是应用最广泛的培养基， 每 一 种 成 分 都 是 对 细 胞 的 尊 重 搭配10%血清可培养绝大多数细胞。常用的基础细胞培养基包括MEM、DMEM、DMEM/F12、RPMI1640，其他基础细胞培养基如 MEMa、IMDM、M199、McCoy's 5A、Ham's F-10、Ham's F-12、Ham's F-12K 和 Leibovitz's L-15，浙卫康基础培养基产品共涵盖以上 12 个大类，可定制不同组分的产品 6

PCR（Polymerase Chain Reaction，聚合酶链式反应）是一种分子生物学技术，用于在生物体外快速、大量地复制特定的DNA片段。尽管PCR实验的原理和操作流程看似简单，但实际操作中却存在许多潜在的问题。以下是一些常见的PCR实验问题及相应的解决方案。 01拖尾、弥散现象 • 可能原因：体系配置偏差（如酶用量、dNTP、镁离子浓度过高）、扩增循环数过多、PCR体系中存在污染、电泳缓冲液不净、电压不稳定、退火时间不当、模板不纯等。 • 解决方案：减少

做科研是一件比较专业的事情，需要的是更多的科研人员通过交流分享以及学术探讨来更快的促进学术的进步。在正式进行一个科研项目的开展之前，需要进行大量的背景知识调研，相应的专业技能储备，还需要足够敏锐的眼光去发现需要解决的科学问题，因为往往是这部分看不见的工作决定了一个科研项目的成败，在正式立项之前，做好一些前期的基础工作是非常必要的。

《小鼠的粗饲料健康密码》 一、粗饲料与小鼠基础饲粮 小鼠基础饲粮组成和营养水平参照 nrc 1994，粗蛋白、粗脂肪、粗纤维等是小鼠正常生长发育所必需的营养成分。 二 维持瘤胃正常功能和机体健康 适宜的粗纤维水平可避免淀粉迅速发酵产酸，降低胃内食糜 pH 值，抑制纤维素分解菌活性，影响正常消化机能，甚至导致机体酸中毒。 维持正常反刍 刺激胃壁，促进瘤胃蠕动和动物正常反刍，产生碱性唾液调节瘤胃内食糜酸度，保证瘤胃内微生物正常

本公司有造模饲料，蛋白&肽，分子类，生化试剂，试剂盒，抗体，离心管，细胞培养，仪器&耗材，蛋白纯化，耗材，IVD原料，核酸胶 marker loading TAE 琼脂糖 GelRed ，Gelgreen无毒染料等等各大品牌的上千款产品，折扣多多。顺丰发货。欢迎查货询价

IP-MS分析，EZH2是多梳抑制复合体2 (PRC2)的功能性酶成分，与长期转录抑制相关。因此，确定EZH2为与Mi-2β蛋白复合物相关的染色质调节蛋白 (图2a)。内、外源性Co-IP表明EZH2和Mi-2β存在相互作用(图2b-c)，而EZH2敲减也显著上调Cxcl9和Cxcl10的水平(图2d)。 之前的研究表明， H3K27me3介导EZH2抑制ISGs的表达。体外证实EZH2沉默后，H3K27me3激活被显著抑制，且H3K27me3激活介导了由Mi-2β/EZH2复合物调控的ISG表达(图2e-g)。进一步ChIP分析证实，Mi-2β沉默后，Cxcl9和Cxcl10启动子区

为了确定Mi-2β如何影响黑色素瘤的免疫反应，进行微阵列分析。富集分析发现，Mi-2β敲除后，IFN-γ信号通路被激活（图1a），IFN-γ应答基因和抗原呈递基因上调（图1b）。IFN-γ在免疫治疗应答中起关键作用。Mi-2β沉默和抗PD-1治疗后Cxcl9和Cxcl10上调（图1c-e）。研究表明Mi-2β富集于基因组转录起始位点，在转录抑制中起重要作用。为了研究Mi-2β抑制IFN-γ信号的分子机制，进行ATAC-seq（染色质可及性），发现基因座内ATAC-seq峰的变化与IFN-γ信号相关（图1f）。

lx-2 细胞，2 传 4，3 天后 4 个皿的细胞全死了，请问是什么原因呀？第一天还正常贴壁只有一些漂浮细胞，第二天没去看第三天全死了

调控蛋白检测：circRNA是由其母基因ABR外显子3-16的外显子通过反向剪接生成的。与正常的PDAC组织和细胞相比，GEM耐药的PDAC组织和细胞中circRNA的表达上调。文献表调研明，QKI、FUS和ADAR1多种蛋白质参与circRNA合成过程中的反向剪接。作者研究这些蛋白与GEM耐药PDAC组织中circRNA表达之间的相关性，发现QKI与circRNA的表达呈正相关。进一步在GEM耐药的PDAC细胞中沉默了QKI，发现circRNA的表达下调，但目基因ABR的表达不受影响。 这些表明：QKI可能参与促进circRNA的形

三阴性乳腺癌（TNBC）是乳腺癌中最恶性、预后最差的亚型。探索TNBC的新型致癌因素和治疗药物仍然是改善预后的重点。四氢姜黄素（THC）是姜黄素（CUR）的主要代谢产物，具有潜在的抗肿瘤活性。但THC在TNBC中的抗肿瘤活性和机制仍不清楚。 2024年11月4日，天津中医药大学康宁/邱峰/张强团队在Journal of Advanced Research（IF=11.4）上发表了题为“Tetrahydrocurcumin targets TRIP13 inhibiting the interaction of TRIP13/USP7/c-FLIP to mediate c-FLIP ubiquitination in triple-negative breast cancer

组学发现：作者通过RNA-seq技术，检测沉默circRNA的PANC-1/GEM耐药株细胞与对照细胞，发现739个差异基因， 包括520个上调基因和219个下调基因。这些差异基因在多种DNA损伤修复通路中富集，包括碱基切除修复、错配修复和核苷酸切除修复。在这些通路中，包含显著下调的共同基因LIG1。LIG1是DNA连接酶家族的成员，在几乎所有DNA损伤修复通路中发挥着重要作用。 应答检测：在GEM抵抗的PDAC组织中，LIG1也高度表达，并且与PDAC组织中的circRNA表达呈正相关。沉默c

第一步，TRPML1是通过泛素蛋白酶体途径降解的 蛋白酶体抑制剂MG132以浓度依赖的方式增强TRPML1的蛋白丰度，而BafaA1对TRPML1没有影响，表明TRPML1是通过泛素蛋白酶体途径降解的（图1a）。 第二步，β-TrCP可能是TRPML1泛素化的主要E3连接酶 Co-IP实验显示，β-TrCP过表达上调TRPML1泛素化水平，β-TrCP ΔF的失活体则不能（图1c）；此外，下调β-TrCP可降低TRPML1泛素化水平（图1d）。另外，Co-IP分析发现，K48R泛素突变体破坏了TRPML1的多泛素化，而K63R突变体则没有。此外

小麦胚芽凝集素(WGA)概述 小麦胚芽凝集素（WGA）是一种植物源性的凝集素，主要从小麦胚芽中提取到，是目前研究最多且最有用的凝集素之一． 小麦胚芽凝集素(WGA)适用范围 用于标记哺乳动物细胞、革兰氏阳性细菌、酵母细胞纤维化瘢痕组织的细胞膜，从而进行荧光成像和分析。也可用于免疫荧光（IF）、免疫组织化学（IHC）和流式细胞术（FC）。 小麦胚芽凝集素(WGA)优点 1.高信噪比 2.荧光强度高 3.不受膜电位控制 4.适用于活细胞和固定细胞 5.对 N-乙

酪胺染料的标记，可能会遇到的问题： 1.非特异性染色：酪胺染料在被HRP催化后，氧化的酪胺具有高度反应性，可能与样本中多个位置的蛋白质发生共价结合，导致背景信号增加。 建议：优化过氧化氢和酪胺的浓度，能减少非特异性染色。降低酶反应时间也有助于减少背景信号。这些都需要客户根据自己的实验进行调整，我们无法给他们一个确定的浓度去尝试。因为不同的实验，环境，操作，都会出现不同的结果。 2.过度放大导致的信号溢出：TSA是

出现了这玩意，请问大家是污染了吗？

第一步，AARS1分别乳酸化YAP和TEADK90和K108位点 乳酸化蛋白质组学KEGG分析富集多种通路，重点集中在Hippo信号通路上，YAP和TEAD1分别在K90和K108位点发生了乳酸化（图1a-b）。IP-WB检测也显示YAP-TEAD发生乳酸化（图1c）。此外，构建YAP K90R和TEAD1 K108R突变体进行IP-WB检测显示没有发生乳酸化（图1d）。另外，葡萄糖剥夺降低YAP-TEAD1的乳酸化水平，而乳酸处理明显恢复其的乳酸化水平（图1e-f）。 第二步，AARS1与YAP-TEAD1相互作用 Co-IP实验发现AARS1与YAP-TEAD1互作（图1g

Mcf7细胞

一、百萤 pH荧光探针Protonex 红600参数 Ex(nm) 576 Em(nm) 597 分子量 698.94 溶 剂 DMSO 存储条件 在-15℃以下保存，避光防潮 二、百萤 pH荧光探针Protonex 红600概述 Protonex Red染料显示出pH依赖性荧光。与大多数在较高pH下荧光更强的荧光染料不同，酸性条件可增强Protonex Red染料的荧光。随着pH从中性降低到酸性，Protonex Red染料的荧光急剧增加。细胞外缺乏荧光消除了洗涤步骤。Protonex Red染料为监测酸性细胞区室（如内体和溶酶体）提供了强大的工具。Protonex Red染料

如题，在文献中看到H16 DMEM，不知道和传统的DMEM有差吗

如果细胞管飘在实验室液氮罐中而没有提桶，可以采取以下几种方法来解决问题： 1. 使用长柄工具捞取：找一个长柄的工具，如金属夹、特制的捞勺或者将火钳等工具的末端包裹上非吸水性材料（如塑料或硅胶），以避免直接接触液氮。确保工具手柄足够长，以便操作者无需直接靠近液氮即可操作。 2. 棉花或布料固定：如果条件允许，可以尝试制作一个临时的提篮或使用棉布、纱布等材料，通过细绳或金属丝固定在一根长杆上，然后小心地伸入液氮

求一株MC3T3-E1细胞，救救孩子吧，孩子的细胞养不起来呜呜呜

第一步，探讨PRMT1在肝细胞癌中上调的机制 已有结果显示，PRMT1的蛋白水平在HCC中上调，但PRMT1 mRNA水平没有变化。推测泛素-蛋白酶体降解可能参与PRMT1的上调。用两种不同的蛋白酶体抑制剂处理细胞，发现PRMT1蛋白水平呈剂量依赖性增加（图1a），表明PRMT1的蛋白水平可以通过泛素介导的降解来调节。 第二步，确定PRMT1降解的关键泛素连接酶 根据设计的筛选策略，E3泛素连接酶FBXO7为候选互作蛋白（图1b-c）。IP-MS分析显示FBXO7是前10个与PRMT1相互作用的候

【DNA提取液】JS0700 质量参数 产品名称：PHENOL:CHLOROFORM:ISOAMYL ALCOHOL(25:24:1) 储存温度：2-8°C 技术信息： 1、PH值：≥7.8 2、用于DNA提取。质控测试：DNA酶Free、RNA酶Free、蛋白酶Free均不含。 3、配合调节pH值的平衡缓冲液使用；Equilibrated with 10 mM Tris, pH 8.0, 1 mM EDTA 【RNA提取液】JS0900 质量参数 产品名称：PHENOL:CHLOROFORM:ISOAMYL ALCOHOL(25:24:1) 储存温度：2-8°C 技术信息： 1、PH值：PH ＜ 5.2 2、用于RNA提取。质控测试：DNA酶Free、RNA酶Free、蛋白酶Free均不含。 3、配合调节

糖尿病肾病（DKD）是一种普遍存在的慢性肾脏疾病，是终末期肾病进展的主要原因。足细胞是覆盖GBM外表面的高度分化的上皮细胞，对于维持GBM的完整性至关重要。因此，足细胞损伤的程度通常用来评估DKD的进展。此外，足细胞中的炎症积聚与足细胞损伤的加重密切相关。 2024年6月，温州医科大学梁广团队在Nat Commun（IF=14.7）上，发表“Podocyte OTUD5 alleviates diabetic kidney disease through deubiquitinating TAK1 and reducing podocyte inflammation and injury”的研究成果。揭示