苏木精-伊红染色法（HE染色法），作为石蜡切片技术中的经典染色方法，广泛应用于组织学、胚胎学及病理学的教学与科研中。该方法利用碱性的苏木精使细胞核及胞质核酸呈现紫蓝色，而酸性的伊红则让细胞质与细胞外基质染上红色。 常见问题及解决方案 一、着色异常（过深或过浅） 着色不当常因染色时间控制不当所致。HE染色需借助镜检来精确控制时间，预实验可帮助确定最佳染色时长。通常，新鲜苏木素的染色时间约为1-3分钟，分化时间亦需

正确的样本保存方法是实验成功的关键，因为不当的保存技术可能会导致样本变质或受损。我们深知，在实验开展前，如何妥善保存细胞、组织、植物和细菌等各类样本，是众多研究者面临的一大难题和学习重点。因此，我们将深入讨论并分享不同样本的处理与保存策略，期望能为您提供有益的参考。 一、细胞样本保存 01悬浮细胞 • 首先，将细胞及其培养液一并收集至15ml或50ml的离心管中，以1500rpm的速度离心3分钟，随后弃去上清液。 • 接着，加入

免疫荧光操作过程 1️⃣细胞准备 （1）取出生长状态良好的细胞，弃培养基，消化重悬细胞。 （2）将24孔圆形爬片放入24孔板的孔中。 （3）根据细胞生长特性取适量细胞于已铺爬片的24孔板中，放入37℃孵箱培养。 2️⃣固定 （1）取出细胞，弃去培养基，用PBS洗细胞3次。 （2）每孔加入1mL的4%多聚甲醛，室温固定10-20min，弃去多聚甲醛； （3）加入1mL的PBS清洗细胞，重复两次。 3️⃣通透 （1）每孔加入1mL的0.5% Triton-X100 ，室温10min，弃去Triton-X100。 （2

一、实验原理 Western blot技术（亦称作蛋白质印迹法）是一种在科研中频繁应用的手段，用于分离并确认蛋白质的身份。该技术通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（即SDS-PAGE）技术，将样本中的各类蛋白质进行分离，随后将这些已分离的蛋白质转移至硝酸纤维素膜或PVDF膜上。此后的步骤涉及将膜与目标蛋白质的特异性抗体共同孵育。在洗涤膜的过程中，非特异性结合的抗体被去除，仅留下与目标蛋白质紧密结合的抗体，最终通过胶片显影或荧光扫描的方式来

PCR（Polymerase Chain Reaction，聚合酶链式反应）是一种分子生物学技术，用于在生物体外快速、大量地复制特定的DNA片段。尽管PCR实验的原理和操作流程看似简单，但实际操作中却存在许多潜在的问题。以下是一些常见的PCR实验问题及相应的解决方案。 01拖尾、弥散现象 • 可能原因：体系配置偏差（如酶用量、dNTP、镁离子浓度过高）、扩增循环数过多、PCR体系中存在污染、电泳缓冲液不净、电压不稳定、退火时间不当、模板不纯等。 • 解决方案：减少

#免疫组化#细胞实验#实验外包

✅如何有效避免串色❓ 🌟1、铺细胞别太密，且尽可能用大体积细胞 ➡️太密就导致一抗结合蛋白增多，更容易出现非特异性染色，且细胞太密拍摄效果很一般，一般6孔板满孔的细胞我会取1/8的量铺到带有爬片的12孔板里，大概12小时后，细胞密度就刚刚好。 ➡️用大体积细胞（例如HeLa），拍摄效果好，HEK细胞相对来说效果欠佳，若用非工具细胞，就无需考虑这个问题。 🌟2、核放在最后染 双抗体染色时可不用活细胞染核液（Hoechst），也就是不要

有没有大佬知道昆虫肠道上皮细胞更新频率是多少？为什么国外做蜜蜂肠道细胞凋亡染色最后统计出来凋亡率能达到8%-40%？这合理吗？我做出来只有1%左右

免疫荧光染色定义和用途 定义 免疫荧光图，又称免疫荧光染色结果图，是利用荧光标记的抗体或抗原作为探针与组织或细胞内特定抗原或抗体结合后，在荧光显微镜下观察得到的图像。通过这种方式，可以确定抗原或抗体的准确位置和分布。 用途 ①·蛋白质定位:荧光标记抗体可用于定位细胞或组织中的特定蛋白质，有助于理解蛋白质的功能、细胞器的结构以及信号传导途径。 ②细胞生物学研究:免疫荧光图在细胞生物学研究中被广泛应用，可以观察

疫组织化学（简称免疫组化）是组织化学的一种，它是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点，通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂，如酶、金属离子、同位素等，显示一定的颜色，并借助显微镜观察其颜色的变化，从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的化学成份或化学性质.免疫组织化学实验做完了,图片采集后结果怎么看?下面跟我一起了解以下三点: 1、看颜色:通常Dab显色棕色，Aec显色为红色，如果说在显微镜

免疫组化，是应用免疫学基本原理-抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及相对定量的研究，称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。 #免疫组化#免疫组化实验#实验技巧#实验外包

细胞实验是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下，在无菌、适温和丰富的营养条件下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能，进而完善相关实验的过程。存在证据等级低的劣势，但由于其来源容易获取、有细胞特异性及实验周期短、成本低等特点，被广泛应用于实验中。需要无菌无毒细胞培养环境、恒定的细胞生长温度(37°C)、合适的气体环境(溶氧和二氧化碳)、适宜的pH及合适的细胞培养基和血清。 细胞的类型 根据细胞的来源（1）原代细胞(

请问各位大佬不同二抗混在一起会有干扰吗？比如抗兔IgG和抗鼠IgG混一起

是封片过程中哪一步出错了吗？

采用柠檬酸钠盐缓冲液95℃ 20min进行抗原修复，但是每次煮完就能发现明显掉片，皮质骨都掉了。。。只剩骨髓里的东西了。 有没有吧友给给建议怎么做下去？

在配制凝胶和电泳时都需要用到缓冲液，那TAE和TBE缓冲液这两种常见的缓冲液，都有啥区别呢？ TAE和TBE TAE缓冲液 实验之中经常将TAE配制成10× 或者 50× 的储液，实验前稀释储液到1×的工作液。1x TAE 缓冲液的成分是： 40 mM Tris (pH 7.6) 20 mM acetic acid 1 mM EDTA 50x TAE储液配制方法： 将Tris(FW=121) 242g，100 ml 0.5 M EDTA， 57.1 ml的冰醋酸溶解在600 ml的去离子水中；而后调节pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。 使用时稀释50倍 即1×TAE Buffer TBE缓冲液 TBE缓冲液可

！

亲爱的小伙伴们，大家好！在实验室工作中，转膜是一个非常重要的步骤。那么，转膜技巧的关键你知道是什么吗？ 首先，选择合适的膜是关键之一。不同的膜具有不同的特点，需要根据实验的具体需求进行选择。转移分子量小于20kDa的蛋白时建议使用小孔径的膜 (如0.22μm)，正常情况下使用0.45μm孔径的膜即可。 其次，正确的缓冲液配制也至关重要。它会影响到蛋白的转移效果。转膜过程会伴随严重的发热现象，建议提前配好缓冲液并在4 ℃冰箱进行

RT-PCR是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。 RNA逆转录合成 cDNA，不同试剂盒举例： #Takara 反转录试剂盒# 1. 测定RNA 浓度

1 TSA技术简介 酪酰胺信号放大(TSA，Tyramide signal amplification)技术是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的高灵敏度检测方法，能够在荧光免疫细胞化学(ICC)，免疫组化(IHC)和原位杂交(FISH)等多个应用场景中实现荧光信号放大，检测到传统方法无法检出的低丰度靶标。 2 TSA技术检测原理 偶联有辣根过氧化物酶 HRP 的二抗与一抗结合后，将邻近区域的荧光染料分子的酪胺基团活化；活化后的染料分子可与靶标分子及靶标分子周围